魚類養(yǎng)殖在我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占有舉足輕重的地位。青魚是我國(guó)“四大家魚”之一,是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖魚類;但是病原微生物諸如病毒對(duì)青魚養(yǎng)殖業(yè)構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。魚類同時(shí)擁有先天免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng);然而其主要依賴先天免疫系統(tǒng)來(lái)抵抗病原微生物的侵染。因此,研究青魚抗病毒先天免疫機(jī)制對(duì)于青魚的疾病防控和健康養(yǎng)殖具有重要的意義。本研究克隆了青魚TRAF家族相關(guān)NF-κB_基因^活化因,_{對(duì)青魚}^{子（the） _TANKTRAF_{基因進(jìn)}family_{行了重組表達(dá)及功}member-associated_能分析NF-κB a,_{為系統(tǒng)}ctivator,_闡明青TANK}+ê魚的先天免疫系統(tǒng)提供了重要數(shù)據(jù)。具體研究結(jié)果如下:在哺乳動(dòng)物中,TANK與NF-κB轉(zhuǎn)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 魚類免疫系統(tǒng)
    1.2 RLR信號(hào)通路的簡(jiǎn)介
    1.3 TANK的研究概況
    1.4 本論文研究目的、內(nèi)容及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
    2.1 bcTANK的全長(zhǎng)cDNA的分子克隆
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1.4.1 青魚脾臟總RNA的提取—Trizol法
            2.1.4.2 合成cDNA第一條鏈
            2.1.4.3 bcTANK編碼序列
    2.2 bcTANK的蛋白表達(dá)
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 主要試劑
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.4.1 bcTANK表達(dá)載體的構(gòu)建
            2.2.4.2 質(zhì)粒中提
            2.2.4.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
            2.2.4.4 免疫印跡分析
    2.3 bcTANK的細(xì)胞內(nèi)定位
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.2 主要試劑
        2.3.3 主要儀器
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.4.1 bcTANK在 HeLa細(xì)胞系中的定位
            2.3.4.2 bcTANK在 EPC細(xì)胞系中的定位
    2.4 bcTANK的功能研究
        2.4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.4.2 主要試劑
        2.4.3 主要儀器
        2.4.4 實(shí)驗(yàn)方法
            2.4.4.1 病毒的生產(chǎn)和滴度測(cè)定
            2.4.4.2 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR
            2.4.4.3 雙熒光報(bào)告實(shí)驗(yàn)
            2.4.4.4 病毒感染實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 bcTANK的分子克隆和序列分析
    3.2 bcTANK的進(jìn)化分析
    3.3 宿主細(xì)胞中bcTANK轉(zhuǎn)錄水平分析
    3.4 bcTANK蛋白的表達(dá)
    3.5 bcTANK的細(xì)胞內(nèi)定位
    3.6 bcTANK介導(dǎo)的抗病毒信號(hào)傳導(dǎo)
    3.7 bcTANK有助于EPC抵御SVCV和 GCRV病毒
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
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