金褐霉素（Aureofuscin）是由金褐鏈霉菌（Streptomyces aureofuscus）產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物,屬于四烯大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,具有抗真菌活性,有待應(yīng)用在醫(yī)療衛(wèi)生、食品加工等更廣泛的領(lǐng)域。因其生物合成的調(diào)控機制尚未明確,金褐霉素的產(chǎn)量較低,限制其進一步應(yīng)用,所以提高金褐霉素的產(chǎn)量成為重中之重。前期實驗通過在金褐鏈霉菌中過表達aurJ3M基因,高效液相色譜（HPLC）分析檢測發(fā)酵產(chǎn)物,金褐霉素產(chǎn)量提高5-6倍。本論文針對aurJ3M和aurT的功能和調(diào)控作用進行近一步研究。（1）生物信息學(xué)分析表明,在金褐鏈霉菌中存在屬于PAS-LuxR家族的調(diào)控因子AurJ3M（EU697915.1）,構(gòu)建aurJ3M基因敲除質(zhì)粒pC1203-11599,通過發(fā)酵產(chǎn)物形態(tài)觀察,HPLC測定aurJ3M基因敲除突變株（ΔaurJ3M）不能合成金褐霉素,初步證實aurJ3M基因?qū)鸷置顾氐纳锖铣善鹫蛘{(diào)控作用;進一步通過反轉(zhuǎn)錄PCR實驗分析,與野生型菌株相比,在ΔaurJ3M中聚酮合成酶基因S0、S1和基因B、C、G、F、D均不發(fā)生轉(zhuǎn)錄,I、J、A基因轉(zhuǎn)錄水平顯著降低,R、E、H基因... 

【文章來源】：遼寧大學(xué)遼寧省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

過表達菌株S.aureofuscus♂aurT的MS接合轉(zhuǎn)移子

第 3 章 aurT 基因?qū)鸷置顾厣锖铣傻挠绊憟D 3-16 aurT 上、下游同源臂 aurT-5、aurT-3 的克隆M:100bp DNA Marker;Lane 1-2:aurT 上游同源臂;Lane 3-4:aurT 下游同源臂獲得的重組敲除質(zhì)粒 pC1203-ΔaurT,圖譜見圖 3-17(a),經(jīng) XbaI 單酶切后能夠得到 1290bp 的 aac(3)IV-OriT 片段，證明基因敲除質(zhì)粒構(gòu)建成功,單酶切電泳結(jié)果見圖 3-17(b)。M 1 2 3 4700bp500bp

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]天然生物抗菌劑納他霉素在食品中的應(yīng)用及研究進展[J]. 宋雪健,張東杰,王洪江,李志江,于金池.  保鮮與加工. 2017(05)
[3]鏈霉菌抗生素生物合成的基因調(diào)控[J]. 黃敏紅,劉田甜,陸群,田永強.  中國抗生素雜志. 2009(07)
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博士論文
[1]恰塔努加鏈霉菌中納他霉素生物合成調(diào)控機制研究[D]. 杜藝嶺.浙江大學(xué) 2011
[2]金褐霉素基因工程菌的構(gòu)建及表達產(chǎn)物的純化[D]. 魏杰.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3254611