化療、放療及手術(shù)等傳統(tǒng)腫瘤治療手段由于種種缺陷,已不能滿足臨床需要。近年來光動(dòng)力治療(Photodynamic Therapy,PDT)、光熱治療(Photothermal Therapy,PTT)及免疫療法(Immunotherapy)等迅速發(fā)展,尤其是基于這些方法的聯(lián)合治療已成為腫瘤治療研究的熱點(diǎn)。本論文從凋亡酶(Caspase enzyme)入手,基于腫瘤微環(huán)境,研究設(shè)計(jì)了caspase-3酶響應(yīng)的納米載藥系統(tǒng),主要研究內(nèi)容及取得成果如下:1.Caspase-3酶響應(yīng)的嵌合肽用于化療/光動(dòng)力聯(lián)合治療本文設(shè)計(jì)了基于腫瘤微環(huán)境中的caspase-3酶響應(yīng)的嵌合肽,用于降低系統(tǒng)毒性的化療/光動(dòng)力聯(lián)合治療。固相合成法合成了兩端具有阿霉素(doxorubicin,DOX)和光敏劑脫鎂葉綠酸鹽-a(pheophorbide-a,pha)的嵌合肽序列。體外的實(shí)驗(yàn)表明,阿霉素只有在和caspase-3酶孵育時(shí)才能被釋放,嵌合肽膠束經(jīng)光照后處理的細(xì)胞毒性達(dá)到了25%,與對照組有較為明顯的差異。共聚焦實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組的嵌合肽具有最高程度的細(xì)胞凋亡比例,實(shí)驗(yàn)組的流式分析結(jié)果顯示高達(dá)61%...

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 緒論
    1.1 腫瘤及其微環(huán)境簡述
        1.1.1 腫瘤簡述
        1.1.2 腫瘤微環(huán)境
            1.1.2.1 微酸性
            1.1.2.2 谷胱甘肽
            1.1.2.3 酶的高表達(dá)
    1.2 腫瘤治療手段
        1.2.1 化療
            1.2.1.1 無機(jī)納米顆粒解決化療耐藥性
            1.2.1.2 有機(jī)納米顆粒解決化療耐藥性
        1.2.2 光動(dòng)力治療
        1.2.3 光熱治療
        1.2.4 免疫治療
    1.3 聯(lián)合治療
        1.3.1 化療/光動(dòng)力聯(lián)合治療
        1.3.2 化療/光熱聯(lián)合治療
        1.3.3 光動(dòng)力/光熱聯(lián)合治療
    1.4 論文設(shè)計(jì)思路及意義
        1.4.1 論文設(shè)計(jì)思路
        1.4.2 論文技術(shù)路線圖
第二章 caspase-3 酶響應(yīng)型納米載藥體系設(shè)計(jì)及其用于乳腺癌光動(dòng)力/化療聯(lián)合治療
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞株
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 ph D,ph ED和 ph DD的制備
        2.3.2 phDD的材料表征
        2.3.3 體外caspase-3 酶切前后高效液相色譜(HPLC)檢測
        2.3.4 蛋白印跡分析
        2.3.5 細(xì)胞毒性測試
        2.3.6 細(xì)胞Calcein AM/PI staining&Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞分析
        2.3.7 藥代動(dòng)力學(xué),小動(dòng)物成像和組織分布
        2.3.8 體內(nèi)聯(lián)合抗腫瘤治療和系統(tǒng)毒性
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 phDD的材料表征
        2.4.2 體外caspase-3 酶切前后高效液相色譜(HPLC)檢測
        2.4.3 蛋白印跡分析和細(xì)胞毒性測試
        2.4.4 細(xì)胞Calcein AM/PI staining&Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞分析
        2.4.5 藥代動(dòng)力學(xué),小動(dòng)物成像和組織分布
        2.4.6 體內(nèi)抗腫瘤聯(lián)合治療和系統(tǒng)毒性
    2.5 本章小結(jié)
第三章 caspase-3 酶響應(yīng)型納米載藥體系設(shè)計(jì)及其用于乳腺癌光動(dòng)力/光熱聯(lián)合治療
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞株
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 PEP,PP2000和PDP的制備
        3.3.2 PDP的自組裝行為和理化性質(zhì)
        3.3.3 細(xì)胞內(nèi)攝取和熒光淬滅
        3.3.4 細(xì)胞毒性和體外高效液相分析
        3.3.5 體外光熱實(shí)驗(yàn)和光聲成像
        3.3.6 體內(nèi)熒光成像和組織分布
        3.3.7 體內(nèi)光動(dòng)力介導(dǎo)的PDP的聚集和光熱成像
        3.3.8 聯(lián)合治療和系統(tǒng)毒性分析
        3.3.9 體內(nèi)光聲成像監(jiān)測凋亡
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.1 PDP的自組裝行為和理化性質(zhì)
        3.4.2 細(xì)胞內(nèi)攝取和熒光淬滅
        3.4.3 細(xì)胞毒性和體外高效液相分析
        3.4.4 體外光熱實(shí)驗(yàn)和光聲成像
        3.4.5 體內(nèi)熒光成像和組織分布
        3.4.6 體內(nèi)光動(dòng)力介導(dǎo)的PDP的聚集和光熱成像
        3.4.7 聯(lián)合治療和系統(tǒng)毒性分析
        3.4.8 體內(nèi)光聲成像監(jiān)測凋亡
    3.5 本章小結(jié)
第四章 全文總結(jié)及展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：4016397