蛹蟲草復(fù)合誘變及固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2023-09-16 10:41
蟲草素是蛹蟲草最重要的代謝產(chǎn)物之一,具有抗病毒、抑制腫瘤生長、干擾人體RNA及DNA合成等藥理作用。目前,人工栽培蛹蟲草的技術(shù)體系雖然相當(dāng)成熟,但人們?cè)趯?duì)菌種使用方面卻比較混亂。實(shí)際栽培中經(jīng)常出現(xiàn)菌種退化、不出草、產(chǎn)量低等各種問題,因而對(duì)蛹蟲草的菌種進(jìn)行研究和選育是十分必要的。本試驗(yàn)開展了 60Coγ與紫外光照結(jié)合的復(fù)合誘變篩選高產(chǎn)蟲草素菌株、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)條件優(yōu)化和蛹蟲草子實(shí)體栽培研究。得到了如下主要研究結(jié)果:(1)以安徽大學(xué)資源保存實(shí)驗(yàn)室蛹蟲草C-8為試驗(yàn)誘變菌株出發(fā)菌株,用60Coγ輻射處理,以正突變率和致死率作為評(píng)判指標(biāo),得到最佳輻照劑量為100 Gy。(2)采用紫外燈(25 W)進(jìn)行第二次誘變,照射時(shí)間為20,40,60,80,100,120 s。采用誘變菌株正突變率和致死率兩個(gè)指標(biāo)得到最佳照射時(shí)間為80 s。復(fù)合誘變得到菌株C1-7,蟲草素含量7.376 mg/g,C-8菌株發(fā)酵物中蟲草素提高了 79%。對(duì)其進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn),繼代培養(yǎng)12代后蟲草素產(chǎn)量穩(wěn)定。(3)利用篩選最佳固態(tài)培養(yǎng)條件為:可溶性淀粉15%、酵母膏3%、PH5.5、初始含水量64%、發(fā)酵時(shí)間13天、前期溫度...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 蛹蟲草簡介
1.2 蛹蟲草的主要有效成分
1.2.1 蟲草素
1.2.2 多糖類
1.2.3 蟲草酸
1.3 蟲草素的研究進(jìn)展
1.3.1 抑菌作用
1.3.2 抑制病毒
1.3.3 殺蟲作用
1.3.4 免疫調(diào)節(jié)
1.3.5 抗腫瘤
1.3.6 調(diào)劑血糖、血脂
1.3.7 治療白血病
1.3.8 抗炎、抗衰老
1.4 微生物誘變育種
1.4.1 60Coγ誘變育種
1.4.2 紫外誘變育種
1.4.3 復(fù)合誘變育種
1.5 蛹蟲草人工栽培的研究
1.6 蛹蟲草發(fā)酵工藝的研究
1.6.1 發(fā)酵工藝
1.6.2 蛹蟲草的液態(tài)培養(yǎng)
1.6.3 蛹蟲草的固態(tài)培養(yǎng)
1.7 研究意義,目的和內(nèi)容
1.7.1 研究意義
1.7.2 研究目的
1.7.3 研究內(nèi)容
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 蛹蟲草菌種
2.1.2 試驗(yàn)試劑和儀器
2.1.3 蛹蟲草培養(yǎng)基
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 蛹蟲草斜面培養(yǎng)
2.2.2 菌種初篩
2.2.3 菌種復(fù)篩
2.2.4 蛹蟲草60Coγ誘變
2.2.5 蛹蟲草復(fù)合誘變
2.2.6 突變菌株遺傳穩(wěn)定性
2.2.7 固態(tài)發(fā)酵中蟲草素測(cè)定方法
2.2.8 正突變率的測(cè)定
2.2.9 致死率的測(cè)定
2.2.10 蛹蟲草的單因素試驗(yàn)
2.2.11 最陡爬坡試驗(yàn)
2.2.12 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)響應(yīng)面分析
2.2.13 數(shù)據(jù)的處理
第三章 結(jié)果與分析
3.1 蛹蟲草篩選
3.1.1 菌落形態(tài)
3.1.2 蛹蟲草菌絲體形態(tài)
3.2 蛹蟲草的分離純化與篩選
3.2.1 誘變劑量的效應(yīng)
3.2.2 60Coγ射線復(fù)合紫外誘變劑量的確定
3.2.3 復(fù)合誘變篩選出菌株的蟲草素產(chǎn)量
3.2.4 C1-7的遺傳穩(wěn)定性
3.3 C1-7菌株固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化
3.3.1 單因素發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
3.3.2 主因素實(shí)驗(yàn)
3.3.3 最陡爬坡實(shí)驗(yàn)
3.3.4 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)響應(yīng)面分析
3.3.5 誘變菌株子實(shí)體階段生長情況比較
第四章 討論與結(jié)論
4.1 討論
4.1.1 蟲草素檢測(cè)條件的建立
4.1.2 60Coγ-紫外誘變效應(yīng)
4.1.3 蛹蟲草篩選
4.1.4 固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化
4.1.5 人工栽培
4.2 結(jié)論
4.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果
本文編號(hào):3846869
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 蛹蟲草簡介
1.2 蛹蟲草的主要有效成分
1.2.1 蟲草素
1.2.2 多糖類
1.2.3 蟲草酸
1.3 蟲草素的研究進(jìn)展
1.3.1 抑菌作用
1.3.2 抑制病毒
1.3.3 殺蟲作用
1.3.4 免疫調(diào)節(jié)
1.3.5 抗腫瘤
1.3.6 調(diào)劑血糖、血脂
1.3.7 治療白血病
1.3.8 抗炎、抗衰老
1.4 微生物誘變育種
1.4.1 60Coγ誘變育種
1.4.2 紫外誘變育種
1.4.3 復(fù)合誘變育種
1.5 蛹蟲草人工栽培的研究
1.6 蛹蟲草發(fā)酵工藝的研究
1.6.1 發(fā)酵工藝
1.6.2 蛹蟲草的液態(tài)培養(yǎng)
1.6.3 蛹蟲草的固態(tài)培養(yǎng)
1.7 研究意義,目的和內(nèi)容
1.7.1 研究意義
1.7.2 研究目的
1.7.3 研究內(nèi)容
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 蛹蟲草菌種
2.1.2 試驗(yàn)試劑和儀器
2.1.3 蛹蟲草培養(yǎng)基
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 蛹蟲草斜面培養(yǎng)
2.2.2 菌種初篩
2.2.3 菌種復(fù)篩
2.2.4 蛹蟲草60Coγ誘變
2.2.5 蛹蟲草復(fù)合誘變
2.2.6 突變菌株遺傳穩(wěn)定性
2.2.7 固態(tài)發(fā)酵中蟲草素測(cè)定方法
2.2.8 正突變率的測(cè)定
2.2.9 致死率的測(cè)定
2.2.10 蛹蟲草的單因素試驗(yàn)
2.2.11 最陡爬坡試驗(yàn)
2.2.12 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)響應(yīng)面分析
2.2.13 數(shù)據(jù)的處理
第三章 結(jié)果與分析
3.1 蛹蟲草篩選
3.1.1 菌落形態(tài)
3.1.2 蛹蟲草菌絲體形態(tài)
3.2 蛹蟲草的分離純化與篩選
3.2.1 誘變劑量的效應(yīng)
3.2.2 60Coγ射線復(fù)合紫外誘變劑量的確定
3.2.3 復(fù)合誘變篩選出菌株的蟲草素產(chǎn)量
3.2.4 C1-7的遺傳穩(wěn)定性
3.3 C1-7菌株固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化
3.3.1 單因素發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
3.3.2 主因素實(shí)驗(yàn)
3.3.3 最陡爬坡實(shí)驗(yàn)
3.3.4 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)響應(yīng)面分析
3.3.5 誘變菌株子實(shí)體階段生長情況比較
第四章 討論與結(jié)論
4.1 討論
4.1.1 蟲草素檢測(cè)條件的建立
4.1.2 60Coγ-紫外誘變效應(yīng)
4.1.3 蛹蟲草篩選
4.1.4 固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化
4.1.5 人工栽培
4.2 結(jié)論
4.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果
本文編號(hào):3846869
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