聚羥基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHAs)是由微生物合成的一種高分子聚酯類物質(zhì),其具有和傳統(tǒng)石油塑料相似的熱塑性,并且還具有良好的生物相容性和生物可降解性等性質(zhì),作為替代傳統(tǒng)石油塑料的新型環(huán)境友好型綠色材料引起廣泛關(guān)注。目前PHAs的生產(chǎn)成本較高、加工性能較差等因素,限制了PHAs在包裝領(lǐng)域及其它領(lǐng)域的應(yīng)用。本研究為了解決PHAs單體結(jié)構(gòu)單一問題,選用2-羥基丁酸(2HB)和3-巰基丙酸(3MP)作為除3-羥基丁酸(3HB)之外的另一種底物,基于自主設(shè)計(jì)的體外合成途徑實(shí)現(xiàn)了共聚酯P(2HB-co-3HB)和P(3MP-co-3HB)的可控合成,并通過¹H-NMR、GPC、DSC和TGC等測(cè)試手段分析了合成的共聚酯的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。首先,通過基因體外重組過表達(dá)方法大量制備了合成途徑中需要的三種酶,并測(cè)定了它們的活性(Pelotomaculum thermopropionicum JCM10971由來的乙酰輔酶A合成酶ACS、Clostridium propionicum JCM1430由來的CoA轉(zhuǎn)移酶PCT、Ralstonia eutrop...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 PHA簡介
        1.2.1 PHA分類
        1.2.2 PHA性質(zhì)
    1.3 PHA的生物合成途徑及相關(guān)酶
        1.3.1 三步合成路徑
        1.3.2 脂肪酸β-氧化路徑
        1.3.3 五步合成路徑
    1.4 PHA合成方法
        1.4.1 生物體內(nèi)合成
        1.4.2 生物體外合成
    1.5 課題研究的目的及意義
第2章 PHA合成相關(guān)酶的體外過表達(dá)和活性測(cè)定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 重組質(zhì)粒
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        2.2.1 重組菌的構(gòu)建
        2.2.2 三種酶的大量制備
        2.2.3 三種蛋白濃度測(cè)定
        2.2.4 三種蛋白酶活力測(cè)定
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 重組菌構(gòu)建
        2.3.2 蛋白的大量制備
        2.3.3 考馬斯亮藍(lán)測(cè)定蛋白濃度
        2.3.4 酶活力測(cè)定
    2.4 小結(jié)
第3章 共聚酯P(2HB-co-3HB)的合成及表征
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 PHA合成相關(guān)酶
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 溶液配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        3.2.1 共聚酯P(2HB-co-3HB)的合成
        3.2.2 產(chǎn)物的提取
        3.2.3 產(chǎn)物分析
        3.2.4 產(chǎn)物熱性質(zhì)分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 共聚酯P(2HB-co-3HB)的合成
        3.3.2 產(chǎn)物的提取
        3.3.3 產(chǎn)物分析
        3.3.4 產(chǎn)物的熱性質(zhì)分析
    3.4 小結(jié)
第4章 共聚酯P(3MP-co-3HB)的合成及表征
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 PHA合成相關(guān)酶
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 溶液配制
    4.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        4.2.1 共聚酯P(3MP-co-3HB)的合成
        4.2.2 產(chǎn)物的提取
        4.2.3 產(chǎn)物分析
        4.2.4 產(chǎn)物的熱性質(zhì)分析
        4.2.5 PCT酶特異性分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 共聚酯P(3MP-co-3HB)的合成
        4.3.2 產(chǎn)物提取
        4.3.3 產(chǎn)物分析
        4.3.4 產(chǎn)物熱性質(zhì)分析
        4.3.5 PCT酶特異性分析
    4.4 小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文與研究成果清單
致謝



本文編號(hào)：3838237