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牦牛酥油及其磷脂的脂質(zhì)組學研究

發(fā)布時間:2023-04-29 17:29
  脂質(zhì)組學從2003年提出以來迅速成為研究熱點,本研究結(jié)合地方特色,以牦牛酥油為出發(fā)點,采用溶劑提取法提取牦牛酥油中磷脂,確定最優(yōu)提取工藝;探討牦牛酥油以及牦牛酥油磷脂對SPF級C57BL/6J小鼠脂質(zhì)代謝的影響;對牦牛酥油磷脂和小鼠肝臟進行脂質(zhì)組學研究;通過Real-time PCR檢測脂代謝相關(guān)基因表達量,以期為牦牛酥油功能特性提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)通過單因素試驗和正交試驗確定出黃色牦牛酥油磷脂最佳提取的工藝為液固比6m L/g,55℃提取60min,去油時間25h;白色牦牛酥油最佳提取的工藝為液固比6m L/g,45℃提取60min,去油時間25h。通過GC-MS分析在牦牛酥油中檢出36種脂肪酸,其中SFA 26種,占脂肪酸總量的73.73%以上,UFA10種,占脂肪酸總量的24.12%以上;磷脂中共檢測出29種脂肪酸,其中SFA 24種,占脂肪酸總量的94.28%以上,UFA 5種,占脂肪酸總量的5%以上。(2)利用不同提取溶劑(乙醇、異丙醇、乙酸乙酯、異己烷、正己烷)提取白色和黃色牦牛酥油中油脂和磷脂,發(fā)現(xiàn)利用正己烷提取出的脂質(zhì)和磷脂得率最高,脂質(zhì)得率分別為84...

【文章頁數(shù)】:160 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 綜述
    1.1 牦牛酥油概況
    1.2 磷脂概況
        1.2.1 磷脂的分離純化方法
        1.2.2 磷脂的分析檢測方法
    1.3 脂質(zhì)組學
    1.4 脂肪代謝相關(guān)基因
    1.5 研究意義
第二章 牦牛酥油磷脂提取工藝研究及脂肪酸成分分析
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗試劑
        2.2.3 儀器設(shè)備
    2.3 試驗方法
        2.3.1 牦牛酥油中磷脂的提取方法
        2.3.2 得率和純度計算
        2.3.3 試驗設(shè)計
        2.3.4 分析方法
    2.4 結(jié)果和分析
        2.4.1 檢測波長選擇
        2.4.2 磷標準曲線
        2.4.3 單因素試驗結(jié)果
        2.4.4 正交試驗結(jié)果
        2.4.5 驗證試驗
        2.4.6 酥油脂肪酸組成的GC-MS分析
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 牦牛酥油中磷脂的不同溶劑提取及脂質(zhì)組學研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試驗材料
        3.2.2 試驗試劑
        3.2.3 儀器設(shè)備
    3.3 試驗方法
        3.3.1 五種不同溶劑提取牦牛酥油磷脂
        3.3.2 油脂得率計算
        3.3.3 磷脂得率計算
        3.3.4 脂肪酸分析
        3.3.5 牦牛酥油以及磷脂UHPLC-QTOF-MS脂質(zhì)組學全定量
    3.4 結(jié)果分析
        3.4.1 油脂以及磷脂提取率
        3.4.2 牦牛酥油以及磷脂脂肪酸分析結(jié)果
        3.4.3 酥油UHPLC-QTOF-MS脂質(zhì)組學全定量分析結(jié)果
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 牦牛酥油及其磷脂對C57BL/6J小鼠脂代謝的影響
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試驗材料
        4.2.2 試驗試劑
        4.2.3 試驗儀器
    4.3 試驗方法
        4.3.1 小鼠分組及飼喂
        4.3.2 觀察指標和測定
        4.3.3 小鼠肝臟病理觀察
        4.3.4 組織脂肪酸分析
    4.4 結(jié)果和分析
        4.4.1 牦牛酥油和磷脂對小鼠體重的影響
        4.4.2 牦牛酥油和磷脂對小鼠血脂水平的影響
        4.4.3 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂對小鼠血糖的影響
        4.4.4 飼喂酥油以及磷脂對小鼠組織HE染色的影響
        4.4.5 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂對小鼠脂肪酸的影響
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
第五章 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂飼喂小鼠對脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試驗材料
        5.2.2 試驗試劑
        5.2.3 試驗儀器
    5.3 試驗方法
        5.3.1 小鼠肝臟總RNA提取與檢測
        5.3.2 熒光定量PCR
        5.3.3 數(shù)據(jù)分析
    5.4 結(jié)果分析
        5.4.1 PCR擴增電泳圖
        5.4.2 熒光定量PCR結(jié)果
    5.5 討論
    5.6 本章小結(jié)
第六章 小鼠肝臟UHPLC-QTOF-MS脂質(zhì)組學全定量
    6.1 引言
    6.2 材料與方法
        6.2.1 試驗材料
        6.2.2 試驗試劑
        6.2.3 儀器設(shè)備
    6.3 試驗方法
        6.3.1 代謝物提取
        6.3.2 上機檢測
        6.3.3 數(shù)據(jù)處理
    6.4 結(jié)果分析
        6.4.1 小鼠肝臟脂質(zhì)組學分析
        6.4.2 主成分分析(PCA)
        6.4.3 正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)得分散點圖
        6.4.4 脂質(zhì)組氣泡圖分析
        6.4.5 差異代謝物的篩選
        6.4.6 聚類分析
        6.4.7 差異代謝物的代謝通路分析
    6.5 討論
    6.6 本章小結(jié)
第七章 結(jié)論與展望
    7.1 結(jié)論
    7.2 展望
參考文獻
致謝
作者簡介
附錄 小鼠肝臟組織脂質(zhì)組學分析



本文編號:3805420

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