白蟲草多糖提取及抗炎活性研究
發(fā)布時間:2020-06-01 15:44
【摘要】:白蟲草(Cordyceps militaris Link)是長白山區(qū)進(jìn)行蛹蟲草繁育過程中在培育床邊自然衍生的一種植物,具有完全的植物生長性質(zhì),是一種新型植物。它與蛹蟲草的生長周期,生長環(huán)境完全一致,目前已成功進(jìn)行人工馴化養(yǎng)殖。并且經(jīng)過應(yīng)用實驗得知,白蟲草的功效與蛹蟲草極其相近,但白蟲草養(yǎng)殖容易,成本低廉,具有極高的應(yīng)用價值。白蟲草的養(yǎng)殖和應(yīng)用為長白山特產(chǎn)植物產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了一條新的途徑。目前對白蟲草研究比較少,有較高的研究價值。本文采用超聲波輔助提取法對白蟲草多糖進(jìn)行提取。通過單因素實驗,研究料液比、提取溫度、提取時間和超聲波功率對白蟲草多糖提取率的影響。通過正交試驗設(shè)計和響應(yīng)面建模確定最佳的提取工藝,進(jìn)而優(yōu)化該工藝的提取工藝參數(shù):提取時間為3 h,提取溫度為60°C,超聲波功率為1600 w,料液比為1:40;將醇沉得到的白蟲草多糖先后通過DEAE-Sepharose和葡萄糖Sephadex G-100色譜柱進(jìn)行分離純化,制備白蟲草多糖純品,在水洗和0.05 M NaCl洗脫部分得到3個明顯主峰,分別命名為CKI,CKII,CKIII;利用PMP-柱前衍生高效液相色譜法(HPLC)測定白蟲草多糖組CKII的單糖組成,確定其中主要有6種單糖,分別為Ara(L-阿拉伯糖),Gal(D-半乳糖),Xyl(D-木糖),Man(D-甘露糖),Glc(D-葡萄糖)和Rha(L-鼠李糖)。建立小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7)和小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(NIH3T3)體外細(xì)胞抗炎模型,對提取所得到的白蟲草多糖進(jìn)行抗炎活性研究。通過檢測給藥前后RAW264.7和NIH3T3細(xì)胞前列腺素(PGE2)和NO分泌量,判斷白蟲草多糖是否具有抗炎活性,同時與羅非昔布抗炎效果進(jìn)行對比,其抗炎效果與給藥量關(guān)系為:未給藥1 mg/mL2 mg/mL5 mg/mL50 mg/mL10 mg/mL羅非昔布。最佳給藥量為10 mg/mL。本研究探究了超聲波輔助法提取白蟲草多糖的最佳提取工藝,分析了白蟲草多糖的單糖組成,研究了白蟲草多糖的抗炎活性,為更好地應(yīng)用白蟲草提供了更多的可能性,對白蟲草中有效成分功效研究及其相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)提供了方向。
【圖文】:
19(D) 料液比對提取率的影響取溫度、超聲波功率、提取時間及料液比對白蟲草多糖提取、B、C、D 分別對應(yīng)提取時間、提取溫度、超聲波率的影響。對提取率的影響:當(dāng)超聲功率設(shè)定為 1000 w,提液比固定為 1:10 時。由圖 3.1A 可知,隨提取時間增超聲波會使細(xì)胞破碎,促進(jìn)內(nèi)溶物溶出,提取時間增而使得提取率增加,但當(dāng)提取時間達(dá)到 3.5 小時后,,為水溶性內(nèi)溶物已經(jīng)溶出完畢。
圖3.2兩因素交互影響白蟲草多糖提取量響應(yīng)面圖
【學(xué)位授予單位】:長春工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TQ464
【圖文】:
19(D) 料液比對提取率的影響取溫度、超聲波功率、提取時間及料液比對白蟲草多糖提取、B、C、D 分別對應(yīng)提取時間、提取溫度、超聲波率的影響。對提取率的影響:當(dāng)超聲功率設(shè)定為 1000 w,提液比固定為 1:10 時。由圖 3.1A 可知,隨提取時間增超聲波會使細(xì)胞破碎,促進(jìn)內(nèi)溶物溶出,提取時間增而使得提取率增加,但當(dāng)提取時間達(dá)到 3.5 小時后,,為水溶性內(nèi)溶物已經(jīng)溶出完畢。
圖3.2兩因素交互影響白蟲草多糖提取量響應(yīng)面圖
【學(xué)位授予單位】:長春工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TQ464
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本文編號:2691704
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