水稻惡苗病是水稻的重要病害,影響水稻的生長發(fā)育,目前在我國分布非常廣泛,經(jīng)常造成嚴重的產(chǎn)量損失。大豆鐮孢根腐病是大豆根腐病害,常由一種或多種鐮孢菌引起,主要癥狀表現(xiàn)為大豆根部及莖基部的腐爛,該病害目前已嚴重影響我國東北及黃淮海等大豆主要產(chǎn)區(qū)。雪松疫霉(Phyto0phthora lateralis Tucker&Mibrath)與栗黑水疫霉[P.cambivor.(Petri)Buisman]是我國進境植物檢疫性病菌,常引起多種植物的毀滅性病害,造成經(jīng)濟損失。種傳病原菌是許多農(nóng)作物病害的重要傳染源。它是作物種子貯藏期的主要隱患,也是苗期和生育期作物病害的主要風險。大豆種子上種傳病原菌的快速檢測是保障大豆種子質(zhì)量,從而預(yù)防種傳病害的首要措施。為了提高對兩種病害病原菌的快速檢測水平,并在病菌侵染初期對病害進行診斷,降低經(jīng)濟損失,這項研究基于 LAMP(loop-mediated isothermal amplification,環(huán)介導(dǎo)等溫擴增)技術(shù),對引起水稻惡苗病的擬輪枝鐮孢(Fusariumverticillioides)以及引起大豆鐮孢根腐病的黃色鐮孢(F.culmorum)建...

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻綜述
    第一章 大豆種傳病原菌的研究現(xiàn)狀
        1 大豆種傳病原菌的為害
        2 常見的大豆種傳病原菌
        3 大豆種傳病原菌的檢測鑒定方法
            3.1 傳統(tǒng)檢測技術(shù)
            3.2 分子生物學技術(shù)
        參考文獻
    第二章 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)的應(yīng)用
        1 應(yīng)用LAMP檢測細菌
            1.1 分支桿菌屬的檢測
            1.2 大腸桿菌0157: H7的檢測
            1.3 沙門菌的檢測
            1.4 副溶血弧菌的檢測
            1.5 志賀菌屬的檢測
            1.6 其它細菌的檢測
        2 應(yīng)用LAMP檢測病毒
            2.1 流感病毒的檢測
            2.2 SARS冠狀病毒的檢測
            2.3 偽狂犬病毒的檢測
            2.4 豬類病毒的檢測
            2.5 其它病毒的檢測
        3 應(yīng)用LAMP檢測寄生蟲
        4 應(yīng)用LAMP檢測真菌和卵菌
        參考文獻
第二部分 研究內(nèi)容
    第一章 基于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)快速診斷由擬輪枝鐮孢引起的水稻惡苗病
        1 材料與方法
            1.1 供試菌株
            1.2 菌株培養(yǎng)與基因組DNA的提取
            1.3 引物設(shè)計與篩選
            1.4 LAMP反應(yīng)體系和結(jié)果判斷
            1.5 特異性試驗
            1.6 靈敏度試驗
            1.7 人工接種水稻發(fā)病組織中擬輪枝鐮孢的檢測
            1.8 水稻惡苗病樣本中擬輪枝鐮孢的檢測
        2 結(jié)果與分析
            2.1 擬輪枝鐮孢LAMP檢測的特異性
            2.2 擬輪枝鐮孢LAMP體系的靈敏度
            2.3 LAMP技術(shù)檢測人工接種發(fā)病的水稻病組織中的擬輪枝鐮孢
            2.4 LAMP技術(shù)檢測田間發(fā)病的水稻病組織中的擬輪枝鐮孢
        3 討論
        參考文獻
    第二章 基于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)快速診斷由黃色鐮孢引起的大豆鐮孢根腐病
        1 材料與方法
            1.1 供試菌株
            1.2 菌株培養(yǎng)與基因組DNA的提取
            1.3 引物設(shè)計與篩選
            1.4 LAMP反應(yīng)體系和結(jié)果判斷
            1.5 特異性試驗
            1.6 靈敏度試驗
            1.7 土壤中黃色鐮孢的檢測靈敏度
            1.8 人工接種大豆發(fā)病組織中黃色鐮孢的檢測
            1.9 大豆鐮孢根腐病樣本中黃色鐮孢的檢測
        2 結(jié)果與分析
            2.1 黃色鐮孢LAMP檢測的特異性
            2.2 黃色鐮孢LAMP體系的靈敏度
            2.3 土壤中人工添加黃色鐮孢分生孢子的檢測
            2.4 LAMP技術(shù)檢測人工接種發(fā)病的大豆病組織中的黃色鐮孢
            2.5 LAMP技術(shù)檢測田間發(fā)病的大豆病組織中的黃色鐮孢
        3 討論
        參考文獻
    第三章 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)快速檢測兩種疫霉
        1 材料與方法
            1.1 供試菌株
            1.2 菌株培養(yǎng)與基因組DNA的提取
            1.3 引物設(shè)計與篩選
            1.4 LAMP反應(yīng)體系與產(chǎn)物判斷
            1.5 特異性試驗
            1.6 靈敏度試驗
        2 結(jié)果與分析
            2.1 LAMP檢測的特異性
            2.2 LAMP體系的靈敏度
        3 討論
        參考文獻
    第四章 黃淮地區(qū)大豆主栽品種種子上種傳病原菌的LAMP檢測
        1 材料與方法
            1.1 供試種子材料
            1.2 檢測的目標病原菌
            1.3 大豆種子攜帶病原菌基因組的提取
            1.4 大豆種子攜帶病原菌的LAMP檢測
            1.5 大豆種子攜帶病原菌的分離驗證
        2 結(jié)果與分析
            2.1 大豆種子攜帶13種病原菌的LAMP檢測結(jié)果
            2.2 大豆種子攜帶病原菌的分離與鑒定
        3 結(jié)論與討論
        參考文獻
附錄 黃淮地區(qū)大豆根部病害的快速診斷
    1 材料與方法
        1.1 供試樣本
        1.2 檢測的目標病原菌
        1.3 病組織總DNA的提取方法
        1.4 病組織中病原菌的LAMP檢測
        1.5 病組織中病原菌的分離與鑒定
        1.6 病組織中分離菌的致病力測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 大豆15種重要根部病原菌的LAMP檢測
        2.2 大豆分離菌株對大豆的致病力
        2.3 山東濟寧、江蘇徐州、安徽宿州地區(qū)15種大豆主要根部病害病原菌的檢出率分析
        2.4 復(fù)合侵染引起黃淮地區(qū)大豆根部病害的狀況分析
    3 討論
    參考文獻
攻讀碩士期間發(fā)表的論文及專利
致謝



本文編號：4039723