玉米是我國最重要的糧食作物之一,鐮孢菌（Fusarium spp.）能引起多種玉米土傳病害,如苗枯病、根腐病、莖腐病和穗腐病等,造成嚴重的產(chǎn)量損失和品質(zhì)下降。本文研究了我國玉米主產(chǎn)區(qū)田間土樣的鐮孢菌種群結(jié)構(gòu)及優(yōu)勢致病種,針對鐮孢屬以及禾谷鐮孢復(fù)合種建立實時熒光定量PCR檢測體系,定量檢測土樣中鐮孢菌的含量,研究了玉米苗枯病病情與土壤含菌量的關(guān)系。主要結(jié)果如下:1.采用稀釋涂布平板法,從全國17個省份的47份玉米田間土樣中進行土壤鐮孢菌分離,將得到58株鐮孢菌進行單孢分離純化,通過形態(tài)學(xué)、特異性引物以及ITS、TEF基因測序比對的方法,共鑒定出9種鐮孢菌。其中,擬輪枝鐮孢（F.verticillioides）(22.41%)、木賊鐮孢（F.equiseti）(20.69%)、禾谷鐮孢復(fù)合種（F.graminearum species complex）(18.97%)分離頻率較高,為優(yōu)勢致病鐮孢,其余6種鐮孢菌包括尖鐮孢復(fù)合種（F.oxysporum species complex）、銳頂鐮孢（F.acuminatum）、層出鐮孢（F.proliferatum）、單隔鐮孢（F.dimerum...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 鐮孢菌引起玉米土傳病害概括
        1.1.1 鐮孢菌引起的癥狀
        1.1.2 鐮孢菌引起的玉米病害
    1.2 玉米苗枯病的發(fā)生概況
        1.2.1 玉米苗枯病的病原
        1.2.2 玉米苗枯病的危害
        1.2.3 玉米苗枯病的流行因素
        1.2.4 玉米苗枯病防治
    1.3 土壤群落檢測方法研究進展
        1.3.1 微生物平板培養(yǎng)法
        1.3.2 分子生物學(xué)的檢測方法
    1.4 實時熒光定量PCR技術(shù)
        1.4.1 熒光定量PCR的原理
        1.4.2 熒光定量PCR的分類
        1.4.3 熒光定量PCR的優(yōu)缺點
        1.4.4 熒光定量PCR的應(yīng)用
    1.5 研究目的及意義
第2章 土壤鐮孢菌的分離鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 采集地點
        2.1.2 實驗儀器設(shè)備
        2.1.3 常用試劑
    2.2 方法
        2.2.1 病原菌的分離
        2.2.2 病原菌的形態(tài)鑒定
        2.2.3 病原菌的分子鑒定
        2.2.4 病原菌致病性測定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 鐮孢菌形態(tài)學(xué)鑒定
        2.3.2 鐮孢菌分子鑒定
        2.3.3 鐮孢種的ITS、TEF基因序列分析
        2.3.4 鐮孢菌種的分離頻率與地域分布
        2.3.5 鐮孢菌致病性鑒定
    2.4 討論
第3章 鐮孢屬及禾谷鐮孢的RT-qPCR檢測
    3.1 材料
        3.1.1 菌株信息
        3.1.2 實驗儀器設(shè)備
        3.1.3 常用藥品
    3.2 方法
        3.2.1 供試菌株DNA提取
        3.2.2 引物設(shè)計及特異性靈敏度檢測
        3.2.3 RT-qPCR反應(yīng)體系的建立及優(yōu)化
        3.2.4 RT-qPCR標準曲線的繪制
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 引物特異性檢測
        3.3.2 引物靈敏度檢測
        3.3.3 RT-qPCR標準曲線的建立
    3.4 討論
第4章 土壤鐮孢菌RT-qPCR的驗證與應(yīng)用
    4.1 材料
        4.1.1 菌株信息
        4.1.2 土樣信息
        4.1.3 實驗儀器設(shè)備
        4.1.4 常用試劑
    4.2 方法
        4.2.1 土壤DNA提取
        4.2.2 土壤檢測體系的驗證
        4.2.3 病害調(diào)查與數(shù)據(jù)分析
        4.2.4 土壤含菌量檢測
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 檢測體系的驗證
        4.3.2 病害調(diào)查與數(shù)據(jù)分析
        4.3.3 土壤鐮孢菌含菌檢測及分析
    4.4 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號：4008130