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黑木相思白腐病病原鑒定

發(fā)布時間:2023-12-10 08:35
  黑木相思(Acacia melanoxylon)為含羞草科(Mimosaceae)金合歡屬(AcaciaMill.)喬木,作為中短輪伐期珍貴樹種,現已成為我國多個省份首推的相思樹種。近年來,廣東省部分黑木相思種植基地發(fā)生了一種新病害,該病害導致枝干枯死或植株死亡,造成了嚴重經濟損失,制約了當地黑木相思的推廣種植。為此,本研究對廣東省黑木相思病區(qū)進行調查,采集病組織進行病原菌分離、純化、鑒定和致病性測定,以確定病原菌,并檢測了不同無性系的抗病性,為進一步研究該病害的預防措施提供參考。主要研究成果如下:1、本研究發(fā)現了一種新病害,黑木相思白腐病。該病害多于春季發(fā)病,發(fā)病率27%,主要發(fā)生在46年生樹木,發(fā)病枝干直徑約610cm,病斑梭形,主干或側枝發(fā)病部位樹皮下陷,病健交界分明,剖開樹皮可觀察到病健交界處有明顯的棕色至黑色分界線。從發(fā)病部位的橫向和縱向剖面可看出韌皮部呈褐色或棕黑色,木質部呈深褐色或黑色。發(fā)病多年的樹木樹皮開裂,剖開樹皮可看到白色腐朽物。該病害造成黑木相思枝干一邊枯死,嚴重時可致整株枯死。2、驗證柯赫氏法則。通過病原菌分離、純化、...

【文章頁數】:62 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
縮寫詞及英漢對照
1 前言
    1.1 黑木相思栽培現狀
    1.2 黑木相思病蟲害發(fā)生現狀
    1.3 木材腐朽菌研究進展
        1.3.1 木腐菌特性及效益分析
        1.3.2 白腐菌腐朽機理
    1.4 Pseudolagarobasidium屬的建立及分類研究
        1.4.1 Pseudolagarobasidium J. C. Jang & T. C hen屬名確立及分類研究
        1.4.2Pseudolagarobasidium acaciicola研究進展
    1.5 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 供試菌株
        2.1.3 供試試劑及配制
            2.1.3.1 試劑
            2.1.3.2 主要溶液配制
        2.1.4 供試培養(yǎng)基
        2.1.5 實驗工具
        2.1.6 試驗儀器
    2.2 方法
        2.2.1 病害調查及樣本采集
        2.2.2 病原菌分離
        2.2.3 分離物純化
        2.2.4 致病性測定
            2.2.4.1 菌絲塊與孢子懸浮液制備
            2.2.4.2 半年生植株接種
            2.2.4.3 兩年生植株接種
            2.2.4.4 病原菌再分離
        2.2.5 病原菌形態(tài)學鑒定
            2.2.5.1 形態(tài)學鑒定依據
            2.2.5.2 菌落生長速度及培養(yǎng)性狀觀察
            2.2.5.3 漆酶活性測定
        2.2.6 病原菌分子生物學鑒定
            2.2.6.1 菌絲體培養(yǎng)和收集
            2.2.6.2 引物設計與合成
            2.2.6.3 DNA提取
            2.2.6.4 PCR擴增
            2.2.6.5 克隆
            2.2.6.6 單菌落PCR篩選陽性克隆
            2.2.6.7 測序
            2.2.6.8 序列分析
        2.2.7 黑木相思白腐病抗性評價
            2.2.7.1 兩年生黑木相思白腐病抗性評價等級劃分標準
            2.2.7.2 黑木相思不同無性系抗性評價
3 結果與分析
    3.1 黑木相思林間病害調查結果
    3.2 病原菌分離與純化
    3.3 致病性測定
        3.3.1 半年生黑木相思植株接種結果
        3.3.2 兩年生黑木相思植株接種結果
            3.3.2.1 側枝接種
            3.3.2.2 主干接種
        3.3.3 病原菌再分離
    3.4 病原菌形態(tài)學鑒定結果
        3.4.1 病原菌形態(tài)特征
        3.4.2 漆酶活性測定結果
    3.5 病原菌分子生物學鑒定結果
        3.5.1 供試菌株DNA提取
        3.5.2 PCR產物檢測
        3.5.3 病原菌rDNA序列分析
    3.6 黑木相思白腐病抗性評價
        3.6.1 兩年生黑木相思對白腐病抗性評價等級劃分標準
        3.6.2 黑木相思不同無性系對白腐病抗性評價結果
4 結論與討論
    4.1 結論
    4.2 討論
        4.2.1 黑木相思白腐病命名
        4.2.2 黑木相思白腐病病原菌的鑒定
        4.2.3 黑木相思白腐病林接種發(fā)病癥狀與自然發(fā)病癥狀比較
        4.2.4 黑木相思白腐病防治策略
        4.2.5 展望
致謝
參考文獻
附錄
    附錄A ITS引物擴增3C241菌株所獲DNA片段序列
    附錄B 3C241菌株ITS序列比對結果截圖



本文編號:3872156

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