粘蟲Mythimna separata(Walker)隸屬于昆蟲綱(Insecta),鱗翅目(Lepidoptera),夜蛾科(Noctuidae),是非常典型的遠(yuǎn)距離遷飛害蟲。資料表明,粘蟲幼蟲密度影響成蟲的遷飛行為,高密度下羽化的成蟲具有遷飛傾向。資料報(bào)道PKG基因影響模式昆蟲的覓食行為。因此,本文利用候選基因法,測定PKG基因?qū)φ诚x遷飛特性的影響,旨在為闡明粘蟲遷飛行為的分子機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。本實(shí)驗(yàn)對粘蟲幼蟲設(shè)置了6個(gè)密度(1頭/瓶、5頭/瓶、10頭/瓶、15頭/瓶、20頭/瓶、30頭/瓶),通過實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)技術(shù),檢測了PKG基因在這6個(gè)飼養(yǎng)密度下5齡幼蟲頭部的mRNA水平的表達(dá)情況。結(jié)果表明,PKG基因在不同的密度下頭部的mRNA表達(dá)量存在差異,且1頭/瓶粘蟲PKG表達(dá)量顯著高于10頭/瓶(P<0.05)。PKG基因在兩種生活型成蟲頭部(1頭/瓶和10頭/瓶)的mRNA表達(dá)水平也存在差異,10頭/瓶的PKG表達(dá)量顯著高于1頭/瓶(P<0.05)。此外,利用紫外分光光度技術(shù),檢測了兩種生活型成蟲頭部的PKG蛋白的活性。結(jié)果表明,10頭/瓶的PKG蛋...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 粘蟲的基本特征
    1.2 粘蟲在農(nóng)業(yè)上的危害
    1.3 防治方法
    1.4 國內(nèi)外研究動(dòng)態(tài)
        1.4.1 粘蟲遷飛行為的研究動(dòng)態(tài)
        1.4.2 PKG基因的研究動(dòng)態(tài)
    1.5 研究目的與意義
    1.6 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.6.1 研究內(nèi)容
        1.6.2 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)試劑名稱
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)配制試劑
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 不同幼蟲密度下,檢測粘蟲5齡幼蟲頭部PKG的mRNA相對表達(dá)量
        2.4.2 兩種生活型粘蟲成蟲PKG蛋白活性的測定
        2.4.3 熒光免疫組織化學(xué)定位粘蟲成蟲腦中PKG位置
        2.4.4 利用昆蟲飛行數(shù)據(jù)采集系統(tǒng),測定兩種生活型粘蟲成蟲飛行能力
        2.4.5 測定兩種生活型粘蟲成蟲的能源物質(zhì)含量
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 不同幼蟲密度下,粘蟲5齡幼蟲頭部PKG的mRNA表達(dá)量分析
        3.1.1 不同處理組總RNA的濃度和純度分析
        3.1.2 RT-qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
        3.1.3 PKG的mRNA的相對表達(dá)量
    3.2 兩種生活型粘蟲成蟲腦中,PKG基因的相對表達(dá)量
    3.3 兩種生活型粘蟲成蟲腦中,PKG蛋白的活性
        3.3.1 兩種生活型粘蟲成蟲蛋白濃度的測定
        3.3.2 兩種生活型粘蟲成蟲PKG蛋白活性的分析
    3.4 定位PKG在粘蟲成蟲腦中的位置
    3.5 通過藥理學(xué)手段改變幼蟲PKG蛋白,檢測成蟲PKG蛋白的活性
    3.6 改變幼蟲PKG蛋白活性,研究PKG基因?qū)Τ上x飛行能力的影響
    3.7 改變幼蟲PKG蛋白活性,研究PKG基因?qū)Τ上x能源物質(zhì)含量的影響
        3.7.1 研究PKG基因?qū)Τ上x糖原含量的影響
        3.7.2 研究PKG基因?qū)Τ上x甘油酯含量的影響
4 討論
    4.1 兩種生活型粘蟲成蟲PKG基因的表達(dá)量與蛋白活性討論
    4.2 粘蟲成蟲腦中PKG基因的定位討論
    4.3 粘蟲PKG基因與飛行能力的關(guān)系討論
    4.4 粘蟲PKG基因與能源物質(zhì)的關(guān)系討論
    4.5 成蟲是否保留幼蟲相關(guān)特性的討論
5 結(jié)論
6 展望
參考文獻(xiàn)
附錄A
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：3752012