苜蓿(Medicago sativa L.)是世界上栽培最早、種植面積最大、利用價值最高的豆科牧草。為滿足國內(nèi)畜牧業(yè)發(fā)展的需求,我國則大量進口苜蓿干草作為飼料。2014年至2015年,本研究從進境美國苜蓿草上多次檢出漆斑菌屬真菌,為明確漆斑菌種類及入侵可能引致的后果,從口岸抽檢的苜蓿草樣品中通過保濕培養(yǎng)、分離純化獲得四種不同的漆斑菌菌株,再通過形態(tài)學(xué)鑒定及分子生物學(xué)手段對四種漆斑菌進行了種類鑒定,同時根據(jù)《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)——進出境植物和植物產(chǎn)品有害生物風(fēng)險分析技術(shù)要求》(GB/T 20879-2007),從進入的可能性,定殖的可能性,擴散可能性,經(jīng)濟的重要性對已確定的漆斑菌種類進行了潛在的風(fēng)險分析,并提出了相應(yīng)的風(fēng)險管理措施,為進境苜蓿草的檢驗檢疫提供重要的技術(shù)儲備。研究結(jié)果如下:(1)對廣東口岸進境的282批苜蓿干草樣品進行分離培養(yǎng),能分離出真菌的苜蓿草共202批,根據(jù)真菌的菌落形態(tài)特征和顯微鏡觀察結(jié)果,初步判斷分離出禾谷漆斑菌菌株(Myrothecium gramineum)26株、查爾漆斑菌(Myrothecium lachastrae)菌株33株、露濕漆斑菌(Myrot...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1.前言
    1.1 苜蓿的形態(tài)及其價值
        1.1.1 苜蓿草的形態(tài)
        1.1.2 苜蓿草的價值
    1.2 苜蓿草發(fā)展現(xiàn)狀及貿(mào)易概況
        1.2.1 國內(nèi)苜蓿草發(fā)展現(xiàn)狀及貿(mào)易概況
        1.2.2 國外苜蓿草發(fā)展現(xiàn)狀及貿(mào)易概況
    1.3 苜蓿病害研究現(xiàn)狀
    1.4 漆斑菌（Myronthecium Tode）的為害
    1.5 進境苜蓿草檢疫監(jiān)管情況
    1.6 本研究的目的和意義
2. 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 樣品來源
        2.1.2 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
        2.1.3 實驗儀器與試劑
    2.2 樣品保濕培養(yǎng)
    2.3 漆斑菌的分離培養(yǎng)
    2.4 漆斑菌的鑒定
        2.4.1 漆斑菌的形態(tài)學(xué)鑒定
            2.4.1.1 保濕培養(yǎng)觀察
            2.4.1.2 培養(yǎng)性狀觀察
            2.4.1.3 形態(tài)特征觀察
            2.4.1.4 形態(tài)鑒定依據(jù)
        2.4.2 漆斑菌分子生物學(xué)鑒定
            2.4.2.1 菌種保存及菌絲體的收集
            2.4.2.2 基因組DNA提取
            2.4.2.3 目的片段擴增
            2.4.2.4 電泳檢測和測序
            2.4.2.5 序列分析與數(shù)據(jù)處理
    2.5 編制檢索表
    2.6 風(fēng)險分析
        2.6.1 風(fēng)險評估
        2.6.2 提出風(fēng)險管理措施
3. 結(jié)果與分析
    3.1 挑選病桿的癥狀
    3.2 四種漆斑菌的菌落生長速度
    3.3 漆斑菌的形態(tài)鑒定和分子生物學(xué)鑒定
        3.3.1 禾谷漆斑菌（Myrothecium gramineum Libert.，1837）
            3.3.1.1 保濕培養(yǎng)性狀
            3.3.1.2 分離培養(yǎng)性狀
            3.3.1.3 形態(tài)學(xué)特征
            3.3.1.4 ITS序列分析
            3.3.1.5 結(jié)論
        3.3.2 查爾漆斑菌（Myrothecium lachastrae Sacc. 1882）
            3.3.2.1 保濕培養(yǎng)性狀
            3.3.2.2 分離培養(yǎng)性狀
            3.3.2.3 形態(tài)學(xué)特征
            3.3.2.4 ITS序列分析
            3.3.2.5 結(jié)論
        3.3.3 露濕漆斑菌（Myrothecium roridum Tode ex Fr.，1970）
            3.3.3.1 保濕培養(yǎng)性狀
            3.3.3.2 分離培養(yǎng)性狀
            3.3.3.3 形態(tài)學(xué)特征
            3.3.3.4 ITS序列分析
            3.3.3.5 討論
        3.3.4 疣孢漆斑菌[Myrothecium verrucaria（Alb. Et Schw.）Ditm., 1813]
            3.3.4.1 保濕培養(yǎng)性狀
            3.3.4.2 分離培養(yǎng)性狀
            3.3.4.3 形態(tài)學(xué)特征
            3.3.4.4 ITS序列分析
            3.3.4.5 討論
    3.4 與國內(nèi)已報道的漆斑菌菌種（變種）形成檢索表
    3.5 風(fēng)險分析
        3.5.1 露濕漆斑菌（Myrothecium roridum Tode ex Fr., 1970）
            3.5.1.1 進入的可能性
            3.5.1.2 定殖可能性
            3.5.1.3 擴散的可能性
            3.5.1.4 傳入后的經(jīng)濟影響
            3.5.1.5 小結(jié)
        3.5.2 疣孢漆斑菌[Myrothecium verrucaria（Alb. Et Schw.）Ditm., 1813]
            3.5.2.1 進入的可能性
            3.5.2.2 定殖可能性
            3.5.2.3 擴散的可能性
            3.5.2.4 傳入后的經(jīng)濟影響
            3.5.2.5 小結(jié)
        3.5.3 禾谷漆斑菌 （Myrothecium gramineum Libert.,1837）
            3.5.3.1 進入的可能性
            3.5.3.2 定殖可能性
            3.5.3.3 擴散的可能
            3.5.3.4 傳入后的經(jīng)濟影響
            3.5.3.5 小結(jié)
        3.5.4 查爾漆斑菌（Myrothecium lachastrae Sacc., 1882）
    3.6 風(fēng)險管理措施
4. 結(jié)論和討論
    4.1 結(jié)論
    4.2 討論
        4.2.1 形態(tài)學(xué)鑒定方法在漆斑菌屬分類中的重要性
        4.2.2 分子生物學(xué)鑒定方法在漆斑菌類學(xué)上的應(yīng)用
        4.2.3 風(fēng)險分析在苜蓿草攜帶漆斑菌檢驗中的意義
    4.3 本研究的創(chuàng)新點及前景展望
致謝
參考文獻
附錄
    1. 露濕漆斑菌（Myrothecium roridum）ITS序列
    2. 疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）ITS序列
    3. 查爾漆斑菌（Myrothecium lachastrae ）ITS序列
    4. 禾谷漆斑菌（Myrothecium gramineum）ITS序列
    5. 攻讀碩士期間已發(fā)表或待發(fā)表的文章



本文編號：3751778