發(fā)布時間：2021-12-31 16:20

　　綠盲蝽（Apolygus lucorum）是中國最常見的盲蝽之一,是一種雜食性害蟲,寄主植物涵蓋49科200多個物種,對農(nóng)業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。嗅覺在綠盲蝽覓食、捕食、躲避天敵、配偶識別、產(chǎn)卵地點選擇等行為過程中發(fā)揮重要作用,這些行為主要依賴于昆蟲靈敏的化學通訊系統(tǒng)和對環(huán)境中信息化合物的識別。因此,對綠盲蝽嗅覺展開研究有助于我們深入理解昆蟲與周圍環(huán)境的通訊機制。解析嗅覺識別過程分子機制的第一步是研究在外周神經(jīng)系統(tǒng)中對化學信息物質(zhì)進行最初識別和篩選的化學感受相關(guān)基因,如氣味受體（ORs）,它編碼的蛋白可特異地識別不同的氣味分子。對ORs的功能展開研究可進一步加深我們對綠盲蝽嗅覺系統(tǒng)的認識,并有助于開發(fā)一種基于化學生態(tài)學的害蟲防控策略。本研究選擇實驗室前人從綠盲蝽觸角轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)篩選到的ORs基因中的11個為候選基因,分別是AluOR11、16、62、66、69、80、82、90、93、99和 105,通過RACE技術(shù)獲得這些ORs基因的全長,并對這些基因序列進行克隆驗證。采用qPCR技術(shù)比較了 11個候選ORs基因在綠盲蝽6種組織中的相對表達水平。利用非洲爪蟾卵母細胞和雙電極電壓鉗系統(tǒng)（T... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 Introduction
    1.1 The economic importance of insects
        1.1.1 Mirid bugs as major insect pests
    1.2 Insect chemoreception and chemical ecology
    1.3 Chemoreceptors in insects
        1.3.1 Odorant Receptors(ORs)
        1.3.2 Odorant-binding proteins(OBPs)
        1.3.3 Ionotrpic Receptors(IRs)
        1.3.4 Gustatory Receptors(GRs)
        1.3.5 Chemosensory proteins(CSPs)
        1.3.6 Sensory neuron membrane proteins(SNMPs)
        1.3.7 Niemann-Pick proteins type C2 (NPC2)
        1.3.8 Odorant degrading enzymes(ODEs)
    1.4 Methods for functional characterization of inseet olfactory receptors
        1.4.1 Expression in Cell Systems
            1.4.1.1 Xenopus oocyte system
            1.4.1.2 Cell lines
            1.4.1.3 Empty neuron system
            1.4.1.4 Recent advances
    1.5 RNA interference(RNAi)
    1.6 Objectives of study
2 Materials and Methods
    2.1 Insect
    2.2 Tissue collection,RNA extraction and cDNA synthesis
    2.3 Rapid amplification of cDNA ends(RACE-PCR)
    2.4 Gene cloning, and qPCR
    2.5 Bioinformatics Analysis
    2.6 Vector construction and cRNA synthesis
    2.7 In vitro expression in Xenopus oocyte and electrophysiological recordings
    2.8 Electroantennography(EAG)
    2.9 Behavioral trial
    2.10 RNA interference(RNAi)
        2.10.1 dsRNA synthesis
        2.10.2 Injection of dsRNA
    2.11 Y-tube olfactometer bioassays
    2.12 Statistical analyses
3 Results
    3.1 Sequence analysis of AlucORs
    3.2 AlucORs gene expression profile
    3.3 Two electrode voltage clamp recordings
    3.4 EAG assay
    3.5 Behavioral trial
    3.6 RNA interference and Y-tube assay after gene silencing
4 Discussion
    4.1 Deorphanization of AlucORs
    4.2 Response profile of AlucOR80
    4.3 EAG and behavioral response of A.lucorum to AlucOR80 ligands
    4.4 AlucORs knockdown
    4.5 AlucOrco knockdown
    4.6 Conclusion
References
Aknowledgements
Adel Khashaveh
Apendix


【參考文獻】：
期刊論文
[1]綠盲蝽氣味受體基因AlucOR40的克隆及功能研究[J]. 張志翔,張美萍,王桂榮,劉楊.  昆蟲學報. 2016(06)
[2]寄主植物花器揮發(fā)性物質(zhì)分析及其對綠盲蝽成蟲的引誘作用[J]. 李耀發(fā),高占林,康云鳳,黨志紅,潘小花,王亞欣,潘文亮.  河北農(nóng)業(yè)大學學報. 2014(04)
[3]綠盲蝽對四種揮發(fā)性物質(zhì)的觸角電位和行為反應[J]. 張尚卿,高占林,黨志紅,李耀發(fā),潘文亮.  華北農(nóng)學報. 2011(03)



本文編號：3560579