為建立一種快速準(zhǔn)確檢測馬鈴薯卷葉病毒（potato leafroll virus,PLRV）的方法,本研究以PLRV CP（coat protein,CP）基因ORF3保守序列為靶標(biāo),建立了PLRV反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（RT-LAMP）檢測體系,并對建立的RT-LAMP檢測體系的特異性、靈敏度、實際應(yīng)用效果進(jìn)行評估。結(jié)果表明,建立的PLRV RT-LAMP檢測方法,在62℃恒溫下擴增50 min,擴增產(chǎn)物中加入雙鏈嵌合熒光染色（SYBR GreenⅠ）,陽性樣品顏色變?yōu)榫G色,陰性樣品顏色仍為褐色,可直接目測判斷待檢測樣品是否感染PLRV。該方法只特異性檢測PLRV,不與馬鈴薯X病毒（PVX）、馬鈴薯Y病毒（PVY）、馬鈴薯S病毒（PVS）、馬鈴薯A病毒（PVA）和馬鈴薯M病毒（PVM）等其他5種馬鈴薯主要病毒發(fā)生交叉反應(yīng)。此外,建立的PLRV RT-LAMP檢測方法的靈敏度較反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）方法高100倍。田間樣品檢測驗證,該方法與標(biāo)準(zhǔn)RT-PCR方法符合率達(dá)100%。本研究建立的以SYBR GreenΙ為顏色指示的PLRV可視化檢測RT-LAMP方法,特異、靈敏、便捷,成... 

【文章來源】：核農(nóng)學(xué)報. 2020,34(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

田間樣品PLRV 的RT-PCR和RT-LAMP檢測結(jié)果

PLRV RT-LAMP 檢測體系

RT-LAMP特異性檢測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]馬鈴薯病毒和類病毒的分子診斷方法研究[D]. 杜志游.浙江大學(xué) 2006

碩士論文
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本文編號：3246846