共生菌Wolbachia感染多種節(jié)肢動物,并且在多種葉螨中均有感染,對宿主的生殖調(diào)控起到一定的作用。Wolbachia胞內(nèi)共生菌可以在宿主體內(nèi)造成持續(xù)穩(wěn)定的侵染,可以在宿主中通過細(xì)胞一代一代的傳遞下去包括水平傳播和垂直傳播。Wolbachia引起宿主生殖異常最常見的一種方式就是誘導(dǎo)胞質(zhì)不親和（cytoplasmic incompatibility,CI）。盡管目前關(guān)于CI機(jī)制的研究很多,但是造成CI分子機(jī)理仍不是很清楚。中國葉螨種群中Wolbachia分布廣泛,本研究用PCR技術(shù)以及多位點序列分析技術(shù)（multilocus sequence typing,MLST）對三種葉螨截形葉螨、二斑葉螨以及紅葉螨中感染的Wolbachia進(jìn)行多樣性及進(jìn)化分析,同時對宿主進(jìn)行遺傳雜交實驗探究Wolbacha對宿主生殖調(diào)控的影響。結(jié)果顯示三種葉螨感染4個不同株系的Wolbachia,且均屬于B大組,其中wTupe3和wTtr1親緣關(guān)系較近,與wTpue1親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。這四個不同Wolbachia株系感染的葉螨中,當(dāng)感染W(wǎng)olbachia雄蟲和不感染雌蟲交配以后,引起強(qiáng)弱不同程度的CI現(xiàn)象,其中wTp... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 Wolbachia概述及其在節(jié)肢動物中的研究進(jìn)展
        1.1 Wolbachia的形態(tài)及分布
        1.2 Wolbachia的系統(tǒng)發(fā)育
        1.3 Wolbachia在宿主中的傳播方式
    2. Wolbachia與宿主之間的互作研究
        2.1 線蟲中的Wolbachia的研究
        2.2 Wolbachia作為一種蟲媒病控制的工具
        2.3 Wolachia與寄主互作研究
        2.4 Wolbachia通過T4SS與宿主細(xì)胞互作
        2.5 細(xì)菌中T4SS結(jié)構(gòu)功能及其效應(yīng)器預(yù)測
    3. 本研究的目的及意義
第二章 葉螨共生菌Wolbachia進(jìn)化分析及CI影響
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 葉螨總DNA的提取
        1.3 葉螨中ITS、wsp序列的擴(kuò)增
        1.4 葉螨內(nèi)Wolbachia的五個持家基因的擴(kuò)增
        1.5 PCR產(chǎn)物純化
        1.6 連接及轉(zhuǎn)化反應(yīng)
        1.7 序列測定與分析
        1.8 篩選100%感染和100%不感染W(wǎng)olbachia品系
        1.9 雜交實驗
    2 結(jié)果與分析
        2.1 三種葉螨鑒定結(jié)果
        2.2 三種葉螨中感染W(wǎng)olbachia株系鑒定
        2.3 Wolbachia對三種葉螨產(chǎn)卵量和CI的影響
        2.4 Wolbachia株系系統(tǒng)發(fā)育分析
    3 討論
第三章 葉螨Wolbachia中四型分泌系統(tǒng)的識別與鑒定
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 葉螨總DNA的提取
        1.3 葉螨總RNA的提取
        1.4 PCR檢測葉螨內(nèi)的共生菌Wolbachia
        1.5 篩選100%感染和100%不感染的葉螨品系
        1.6 T4SS引物設(shè)計與制備
        1.7 PCR產(chǎn)物純化與連接轉(zhuǎn)化
    2. 結(jié)果
        2.1 T4SS基因的排列情況
        2.2 T4SS的RT-PCR結(jié)果
    3. 討論
第四章 Wolbachia四型分泌系統(tǒng)(T4SS)保守性和功能分析
    1. 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 DNA提取
        1.3 T4SS基因序列擴(kuò)增
        1.4 PCR產(chǎn)物純化及連接轉(zhuǎn)化
        1.5 序列比對與蛋白預(yù)測
        1.6 數(shù)據(jù)處理
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 不同株系Wolbachia中基于virB11的進(jìn)化以及MLST分析
        2.2 比較不同Wolbachia株系中vir基因的核酸及氨基酸的突變
        2.3 在wTpue1株系中ribA同源基因在A、B大組中的功能結(jié)構(gòu)域
    3. 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Type Ⅳ secretion system in Helicobacter pylori:a new insight into pathogenicity[J]. Department of Medical Microbiology and Parasitology,School of Medical Technology,Jiangsu University,Zhenjiang 212001,China (Zhong Q,Shao SH,Cni LL,Ju XL and Dong SR)School of Medicine,Beihua University,Jilin 132001,China (Mu RH).  Chinese Medical Journal. 2007(23)

碩士論文
[1]共生菌Wolbachia和Cardinium對中國截形葉螨和皮氏葉螨生殖調(diào)控作用的研究[D]. 朱路雨.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]共生菌Wolbachia的分子檢測及其對美洲棘薊馬種群適合度的影響[D]. 董菁.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012



本文編號：3205312