核桃(Juglans regia L.)是世界重要的堅果樹種,含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),是集食用、藥用、材用等多種經(jīng)濟(jì)價值于一身的“木本油料”戰(zhàn)略樹種。核桃分布廣泛,總產(chǎn)量約400萬噸,我國種植面積和果實產(chǎn)量均居世界第一。然而在生產(chǎn)中,“核桃黑”發(fā)生嚴(yán)重,其在我國陜西、四川、山東等核桃種植區(qū)均有不同程度的發(fā)生�！昂颂液凇钡陌l(fā)生與核桃炭疽病、核桃黑斑病等病原及舉肢蛾、桃蛀螟等蟲害有關(guān)。結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和遺傳學(xué)手段對“核桃黑”病原菌進(jìn)行鑒定,通過拮抗實驗表明菌株S21和菌株B1(Bacillus subtilis)對“核桃黑”病原菌具的抑制效果,并結(jié)合載體殼聚糖A(CH)和殼聚糖B(CL)進(jìn)行室內(nèi)和田間防治研究。取得如下結(jié)果:1.本研究通過組織分離法從陜西乾縣的核桃炭疽病感病植株分離獲得一株炭疽病菌,命名為菌株HTTJ;從陜西山陽核桃表面有黑斑的植株及核桃果仁水腐病的感病植株分別分離出一株泛團(tuán)菌HB及一株蒼白桿菌XF。人工接種條件下,分離得到的菌株均表現(xiàn)出相應(yīng)的致病性。菌株HTTJ被鑒定為膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),菌株HB被鑒定為成團(tuán)泛菌(Pantoea agglomerans)及菌株XF鑒定為Ochrobactrum pituitosum。2.通過平板對峙試驗篩選出對核桃炭疽病病原菌具有顯著拮抗作用的真菌菌株S21和細(xì)菌菌株B1,其對菌株HTTJ的菌絲生長抑制率分別達(dá)到了72.39%和49.96%。菌株S21在與菌株HB及菌株XF對峙培養(yǎng)時,其抑菌圈寬度分別達(dá)到了7.97 mm和7.67mm,菌株S21經(jīng)分子生物學(xué)鑒定為黑附球菌(Epicoccum nigrum)。3.確定了CH和CL抑制菌株XF和菌株HB的最低濃度,并測定其對炭疽菌株HTTJ的抑制作用。CH對菌株XF和菌株HB的最低抑菌濃度分別為0.3 g/L和3.5 g/L,CL對菌株XF和菌株HB的最低抑菌濃度分別為0.2 g/L和0.5 g/L。當(dāng)CH濃度為0.8 g/L,其對菌株HTTJ的抑制率達(dá)到60%且可穩(wěn)定保持;當(dāng)CL濃度為1.0 g/L,其抑菌率才達(dá)到40%且濃度差異不顯著;因此相同濃度的CH比CL抑制菌株HTTJ的效果顯著且穩(wěn)定。4.室內(nèi)及大田試驗結(jié)果表明,配制的混合制劑B1GA(由菌株B1、CH、GA、溴氰菊酯、無菌水配制而成)及XLCH(由CH、硫酸鏈霉素、溴氰菊酯、無菌水配制而成)均對菌株HTTJ有一定的抑制作用,且B1GA防治效果更加顯著,達(dá)到80%。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S436.64
【部分圖文】：

測量各處理的菌落直徑 R 及對照組菌落直徑 R0（孫玉英等 2015）。本試驗中的測量數(shù)據(jù)采用 SPSS 數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行處理及分析。按下列公式計算抑制率:菌絲生長抑制率（%）=（R0﹣R）/（R0﹣R1）× 100%2.2.6 統(tǒng)計數(shù)據(jù)的處理與分析實驗中的測量數(shù)據(jù)采用 Microsoft office excel 2007 和 SPSS 11.0 數(shù)據(jù)分析軟件，進(jìn)行統(tǒng)計分析。2.3 結(jié)果與分析2.3.1 核桃炭疽病病原菌致病性測定采用創(chuàng)傷接種菌株 HTTJ 的健康核桃葉片開始出現(xiàn)淡褐色小病斑，隨著病斑擴(kuò)展顏色加深，培養(yǎng) 8 d 后，葉片形成橘色分生孢子堆，而對照組葉片無明顯發(fā)病癥狀（圖2-1）。病原接種的核桃葉片發(fā)病癥狀與田間葉片發(fā)病癥狀相同，對接種后的發(fā)病出現(xiàn)典型病斑的葉片再次進(jìn)行組織分離，純化培養(yǎng)，再次分離到培養(yǎng)特征和形態(tài)同菌株 HTTJ一致的病原菌，符合柯赫氏法則，證明接種用的菌株 HTTJ 為核桃炭疽病的病原菌

圖 2-2 C. gloeosporioides 菌落形態(tài)特征A：培養(yǎng) 7 d 的菌落；B：培養(yǎng) 15 d 的菌落Fig. 2-2 The colony morphology of C. gloeosporioidesA: colony cultured 7 d; B: colony cultured 15 d核桃炭疽病病原菌菌株在 PDA 培養(yǎng)基上均呈等徑輻射生長:菌株正面中間黑灰絲中間氈狀稍隆起，邊緣白色絮狀，反面青灰色。病原菌子實體在病斑上聚生，深褐色；培養(yǎng) 10d 后菌落上產(chǎn)生橙色分生孢子團(tuán)（圖 2-2），分生孢子產(chǎn)生在子盤上（圖 2-3-C）。分生孢子單胞無色，長橢圓形（圖 2-3-B）；孢子在萌發(fā)出有分枝的芽管，其頂端形成卵形附著胞（圖 2-3-C）。

圖 2-2 C. gloeosporioides 菌落形態(tài)特征A：培養(yǎng) 7 d 的菌落；B：培養(yǎng) 15 d 的菌落Fig. 2-2 The colony morphology of C. gloeosporioidesA: colony cultured 7 d; B: colony cultured 15 d核桃炭疽病病原菌菌株在 PDA 培養(yǎng)基上均呈等徑輻射生長:菌株正面中間黑灰，氣生菌絲中間氈狀稍隆起，邊緣白色絮狀，反面青灰色。病原菌子實體在病斑上聚生，近球形，深褐色；培養(yǎng) 10d 后菌落上產(chǎn)生橙色分生孢子團(tuán)（圖 2-2），分生孢子產(chǎn)生在分生孢子盤上（圖 2-3-C）。分生孢子單胞無色，長橢圓形（圖 2-3-B）；孢子在萌發(fā)過程中長出有分枝的芽管，其頂端形成卵形附著胞（圖 2-3-C）。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2842491