軟腐病是大白菜包心后期的主要病害,又稱水腐病和腐爛病,發(fā)生在各個地區(qū)。隨著生產(chǎn)面積的逐步擴大和連年種植,該病害在主要產(chǎn)區(qū)有逐漸蔓延的趨勢,其致病菌常為胡蘿卜軟腐果膠桿菌(Pectobacterium carotovorum subsp.Carotovorum簡稱Pcc)。近幾年,在中國黑龍江省哈爾濱市發(fā)現(xiàn)了一種具有類似軟腐病癥的新病,其腐爛斑點首先在外葉的葉柄基部觀察到,逐漸發(fā)展和擴大、甚至整株植株腐爛。與Pcc引起的軟腐病癥狀不同,腐爛顏色較深,沒有明顯的臭味,中肋纖維分解較慢,短縮莖不易腐爛、易長側(cè)芽。本文研究通過一系列生物學鑒定和分子鑒定,確定哈爾濱地區(qū)引起大白菜軟腐病的病原菌,并進行致病力測定和抗性鑒定方法研究。其得到結(jié)果如下:(1)通過對哈爾濱及其周邊地區(qū)大白菜軟腐病植株上分離的5株病原菌的菌落特征、革蘭氏染色、鞭毛染色進行鑒定,確定大白菜軟腐病新的病原菌為泛菌屬(Pantoea)。(2)對分離得到的5株病原菌進行致病力測定,結(jié)果顯示:接種1、3、5號菌株的植株病癥與田間大白菜軟腐病新的病癥相同,而2、4號菌株發(fā)病病癥則略有不同,因此1、3和5號菌株很可能是大白菜軟腐病的致病菌。(3)通過利用16S rDNA,DNA gyrase subunit B(gyrB)基因和RNA polymerase sigma factor(rpoD)基因?qū)?株病原菌進行了分子鑒定,確定1、3、5號菌株為成團泛菌(Pantoea agglomerans),2、4號菌株則為菠蘿泛菌(Pantoea ananatis)。且1、3、5號菌株的16S rDNA序列GenBank登錄號為MK335467、MK335468和MK335469;基于gyrB基因和rpoD基因序列GenBank登錄號為MK439934、MK439935、MK439936和MK439937、MK439938、MK439939。(4)對成團泛菌進行生物學特性鑒定:1)最適生長溫度為30℃,致死溫度為41℃。2)革蘭氏反應為陰性,周生鞭毛;兼性厭氣,沒有氣體發(fā)酵;菌落可或不可產(chǎn)生黃色色素。3)可以利用D-核糖,D-甘露糖醇,D-果糖,海藻糖產(chǎn)酸。4)可利用蔗糖和葡萄糖作為碳源,而不能利用硝酸鹽等作氮源。5)氧化酶活性反應測定為陰性;過氧化氫試驗呈陽性;能生成硫化氫;甲基紅反應為陰性。(5)試驗初步建立了一套大白菜對成團泛菌的抗性鑒定方法。最佳接種方法為傷口滴接;菌懸液最佳接種濃度為10~(12)個/mL;最佳接種溫度為白天30℃/黑夜25℃;接種最佳苗齡是7-8片葉期;濕度是90-100%為最佳。
【學位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：S436.341.13
【部分圖文】：

田間大白菜軟腐病癥狀Figure3-1Chinesecabbagesoftrotsymptomsinthefieldc

注：a.b：成團泛菌；c.d：菠蘿泛菌Note：a.b.Pantoea agglomerans；c.d.Pantoea ananatis .圖 3-3 田間接種大白菜軟腐病病癥Figure 3-3 The soft rot symptoms of Chinese cabbage in the fielddc

17注：a.b：成團泛菌；c.d：菠蘿泛菌Note：a.b.Pantoea agglomerans；c.d.Pantoea ananatis .圖 3-4 溫室內(nèi)活體接種大白菜軟腐病病癥Figure 3-4 The soft rot symptoms of Chinese cabbage in the greenhousecd
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本文編號：2842489