發(fā)布時(shí)間：2020-08-27 20:15

【摘要】：植物內(nèi)生真菌是具有農(nóng)藥活性開發(fā)潛力的重要微生物資源,不少內(nèi)生真菌的次生代謝產(chǎn)物也具有良好的抑菌作用,在農(nóng)藥創(chuàng)制領(lǐng)域存在重要的影響。本研究以狹葉坡壘Hopea chinenisis Hand.-Mazz.和山橙Melodinus suaveolens Champ.ex Benth.兩種植物為研究對(duì)象,采用組織塊培養(yǎng)法、分子生物學(xué)研究等方法對(duì)兩種植物的內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離鑒定,并評(píng)價(jià)了分離得到的內(nèi)生真菌的生物活性,旨在為具有潛在抑菌活性的內(nèi)生真菌的開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。結(jié)合菌種形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)并通過NCBI基因庫的序列相似性比對(duì)對(duì)兩種植物的內(nèi)生真菌進(jìn)行了鑒定,從山橙根、枝、葉等部位中共分離出20株內(nèi)生真菌,分屬于2個(gè)門,2個(gè)亞門,5個(gè)綱,15個(gè)目,15個(gè)科,15個(gè)屬；從狹葉坡壘根中共分離出13株內(nèi)生真菌,分屬于2個(gè)門,2個(gè)亞門,5個(gè)綱,9個(gè)目,12個(gè)科,13個(gè)屬。平板對(duì)峙法測定結(jié)果表明:山橙菌株M4及狹葉坡壘菌株H21對(duì)水稻稻瘟病菌具有顯著的抑菌活性,其抑制率達(dá)到50%以上；菌絲生長速率法測定結(jié)果表明:在20 mg/mL濃度下,菌株M4發(fā)酵液對(duì)禾谷鐮刀菌、菌株H12發(fā)酵液對(duì)香蕉枯萎病4號(hào)小種均具有顯著生物活性,其抑制率分別為40.92%和60.23%。分別用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇通過快速溶劑萃取法對(duì)菌株H12菌絲體進(jìn)行提取,采用菌絲生長速率法測定所得粗提物其對(duì)香蕉枯萎病4號(hào)小種、香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、火龍果潰瘍病菌的生物活性,結(jié)果表明:在1Omg/mL的濃度下,4種粗提物對(duì)香蕉枯萎病4號(hào)小種均無生物活性,而對(duì)香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、火龍果潰瘍病菌均具有一定的生物活性,其中石油醚粗提物對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制率最為顯著,為18.15%,乙酸乙酯粗提物對(duì)香蕉炭疽病菌的抑制率最為顯著,為32.84%,甲醇粗提物對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制率最為顯著,為76.79%,丙酮粗提物對(duì)香蕉炭疽病菌的抑制率最為顯著,為43.95%。結(jié)合基因克隆與序列分析構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,將菌株H12鑒定為Piptoporellus soloniensis。綜合運(yùn)用硅膠柱層析、凝膠Sephadex LH-20柱層析、薄層層析等分離技術(shù)對(duì)P.soloniensis菌絲體甲醇和丙酮粗提物進(jìn)行了初步化學(xué)成分分離,得到3個(gè)化合物,化合物1鑒定為ergosta-5,7,22-trien-3ββ-o1,化合物2鑒定為(22E)-5α，8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-o1,化合物3結(jié)構(gòu)待鑒定。其中化合物2對(duì)香蕉枯萎病4號(hào)小種、香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、火龍果潰瘍病菌均無顯著的生物活性。本研究從狹葉坡壘和山橙中分離并鑒定了 33株內(nèi)生真菌,其中P.soloniensis為抑菌活性顯著菌株并對(duì)此菌株發(fā)酵液及菌絲體粗提物進(jìn)行了活性評(píng)估。研究結(jié)果表明,兩種植物中均有開發(fā)成生物源殺菌劑的內(nèi)生真菌,在農(nóng)業(yè)上具有重要的開發(fā)價(jià)值。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S482.292
【圖文】：

礴三株活性明顯的菌株對(duì)香蕉枯萎病4號(hào)小種的抑菌活性F論.3一A

一三株活性明顯的菌株對(duì)香蕉炭疽病菌的抑菌活性Fig.3一5Anli幾n啟a】.odvityof3臺(tái)t拍j

三株活性明顯的菌株對(duì)水稻稻瘟病菌的抑菌活性Fig，3芍A幻ti偽ng目魷丘，ltyof3s廿a油初thpoten扭ctivityagainstPg門sea

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2806572