【摘要】：中藥材是浙江省的十大農(nóng)業(yè)主導產(chǎn)業(yè)之一,基本形成了白術(shù)、杭白菊等“浙八味”道地藥材和鐵皮石斛等名貴藥材的優(yōu)勢產(chǎn)區(qū),是農(nóng)民增收的重要經(jīng)濟來源。但病害基礎(chǔ)性研究薄弱,登記農(nóng)藥產(chǎn)品少及質(zhì)量安全體系滯后,導致了農(nóng)藥殘留和食品安全問題成為制約行業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵因子之一,因此弄清楚病害發(fā)生、危害和規(guī)律,對中藥材的生產(chǎn)變得尤為重要。本研究從浙江省白術(shù)、杭白菊和鐵皮石斛主產(chǎn)區(qū)采集病害樣品,通過病原菌分離、致病性試驗,綜合形態(tài)學和分子系統(tǒng)發(fā)育分析對病原菌進行了分離、鑒定,并初步研究了其防治。明確了白術(shù)立枯病病原為立枯絲核菌(Rhizoctonia solani),對噻呋酰胺和咯菌腈的敏感性最高,EC_(50)值均為0.06μg·mL~(-1);白絹病病原為齊整小核菌(Sclerotium rolfsii),對吡唑醚菌酯敏感性最高,EC_(50)值為0.02μg·mL~(-1)。白術(shù)葉斑病病原為Phoma exigua,對葉斑病菌生物學特性測定表明:該菌菌絲生長的最適溫度為28℃,最適pH為8;不同碳源與氮源對其菌絲生長的影響差異顯著,其中可溶性淀粉和蛋白胨分別為最適碳源與氮源;當溫度為24℃、相對濕度為100%時,最適于分生孢子萌發(fā);菌絲和分生孢子的致死溫度分別為47℃和54℃;藥劑敏感性測定結(jié)果表明:孢子對吡唑醚菌酯的敏感性最高,EC_(50)值為0.10μg·mL~(-1);在離體條件下,對活性較強的殺菌劑進行了防效篩選,結(jié)果表明:吡唑醚菌酯8.5μg·mL~(-1)濃度藥液對葉斑病的離體葉片保護效果達到100%。鐵皮石斛黑斑病菌為細極鏈格孢(Alternaria tenuissima),對咯菌腈的菌絲敏感性最高,EC_(50)值為0.10μg·mL~(-1);殺菌劑防效篩選結(jié)果表明:苯醚甲環(huán)唑2.8μg·mL~(-1)濃度藥液對黑斑病的離體葉片保護效果為49.28%。鐵皮石斛炭疽病病原為茶樹炭疽(Colletotrichum fructicola),對咪鮮胺的菌絲敏感性最高,EC_(50)值為0.02μg·mL~(-1);殺菌劑防效篩選結(jié)果表明:苯醚甲環(huán)唑4.8μg·mL~(-1)濃度藥液對炭疽病的離體葉片保護效果為42.00%。杭白菊葉枯病病菌為Phoma bellidis,為研究田間葉枯病菌對多菌靈的抗性程度,采用區(qū)分劑量法檢測了34株杭白菊葉枯病菌對多菌靈的抗藥性,并對不同表現(xiàn)型病菌的β-tubulin基因進行分析比較。結(jié)果顯示:杭白菊葉枯病菌對多菌靈的抗性頻率高達93.94%,且均為高水平抗性,分子機制為β-tubulin基因第198位發(fā)生突變(E198A)。同時,采用菌絲生長速率法,測定了葉枯病菌對吡唑醚菌酯的敏感性,結(jié)果表明:葉枯病菌群體對吡唑醚菌酯的敏感性差異較大,其中33株菌株EC_(50)值在0.060~0.370μg·mL~(-1)之間,呈連續(xù)正態(tài)分布,平均EC_(50)值為0.177μg·mL~(-1),即為桐鄉(xiāng)杭白菊葉枯病菌群體對吡唑醚菌酯的敏感基線。
【學位授予單位】：浙江農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S435.672
【圖文】：

經(jīng) 2015~2016 年調(diào)查發(fā)現(xiàn)，浙江省磐安縣白術(shù)種植區(qū)立枯病和白絹病發(fā)生較輕，立枯病發(fā)病初期莖基部出現(xiàn)水漬狀暗褐色病斑，病斑環(huán)莖蔓延。隨后植株整體表現(xiàn)萎蔫，頂部葉片下垂干枯，近地面葉片出現(xiàn)大面積黑褐色病斑，莖基部溢縮，表皮都為黑褐色病斑（圖 2.1 a b）。白絹病發(fā)病初期在莖基部傷口開始發(fā)病，隨著病情發(fā)展，莖基部出現(xiàn)水漬狀、暗褐色、不規(guī)則病斑，近地面葉片黃化萎蔫。病情后期莖基部和近地面葉片被白色呈絹絲狀菌絲纏繞，植株可從基質(zhì)中輕易拔起，葉片、莖部和土層中可見大量油菜籽狀茶褐色菌核（圖 2.1 c d）。葉斑病發(fā)生較為嚴重，病株率可達 70~80%，病重植株全株焦枯死亡。病害一般在 4 月下旬至 5 月初始發(fā)生，6~8 月份溫濕度適合時發(fā)病嚴重，未清理病殘體的連作田塊發(fā)病更為嚴重，9 月進入病情末期，但仍有發(fā)生。葉斑病菌首先侵染莖基部老葉，后向上擴展，病情嚴重時擴展至整株，導致全葉焦枯（圖 2.1 e f）。發(fā)病初期葉片上產(chǎn)生大小不等的褐色斑點，病斑形狀受葉脈限制，后期病斑不斷擴大，中央為灰白色，出現(xiàn)大量黑色小點，即分生孢子器，分生孢子可通過雨水、風力等方式進行傳播至附近植株引起發(fā)病。

2.2.2 分離物致病性分別將立枯病的病樣分離物 PARS16-1 和 PARS16-2，白絹病的病樣分離物PASR16-1 和 PASR16-2，葉斑病的病樣分離物 PAPE16-1 和 PAPE16-2 進行致病性試驗。結(jié)果表明了三種病害分離物對白術(shù)具有致病性，且致病癥狀與田間癥狀相似，且對照處理均未發(fā)病。此外分離物 PASR16-1 和 PASR16-2 對白術(shù)莖桿同樣具有致病性（圖 2.2）。對接種發(fā)病后的 3 種病斑進行再分離，獲得與原菌株形態(tài)一致的病原菌，根據(jù)柯赫氏法則，明確菌株P(guān)ARS16-1和PARS16-2，PASR16-1和PASR16-2，PAPE16-1和 PAPE16-2 分別為白術(shù)立枯病、白絹病和葉斑病的病原菌。

9 d 后菌核顏色變?yōu)椴韬稚�，表面光滑，不與菌絲相連，呈近球形或橢球形（圖2.3 d-f），大小為（1.45～1.76）mm×（1.29～1.61）mm。

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 付開聰,馮德強,張紹云,王進紅,張雪梅,史永鋒,唐學明,葉華,張靜,字應偉;鐵皮石斛集約化高產(chǎn)栽培技術(shù)研究[J];中草藥;2003年02期

2 梁忠紀;;鐵皮石斛的人工栽培[J];農(nóng)家之友;2003年03期

3 袁正仿,張?zhí)K鋒,遠凌威;鐵皮石斛高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù)[J];河南農(nóng)業(yè)科學;2004年02期

4 查學強;魏鵬;羅建平;;8種產(chǎn)地鐵皮石斛蛋白質(zhì)和同工酶分析[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2007年27期

5 杜剛;楊海英;朱紹林;張廣求;;鐵皮石斛種子誘導成苗試驗[J];中藥材;2007年10期

6 張奇;段承俐;;鐵皮石斛的鑒定研究[J];生物技術(shù)通報;2008年06期

7 白美發(fā);黃敏;;鐵皮石斛高效設施栽培技術(shù)研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2008年35期

8 梁重堅;陳志權(quán);;鐵皮石斛組培小苗馴化和病蟲害防治技術(shù)[J];農(nóng)家之友(理論版);2009年03期

9 諸燕;斯金平;郭寶林;何伯偉;張愛蓮;;人工栽培鐵皮石斛多糖含量變異規(guī)律[J];中國中藥雜志;2010年04期

10 盧聲仙;何鐵光;王愛勤;黃島平;韋柱楊;張向軍;;廣西鐵皮石斛化學成分提取方法研究[J];西南農(nóng)業(yè)學報;2010年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 諸燕;斯金平;張愛蓮;;人工栽培鐵皮石斛多糖質(zhì)量分數(shù)研究[A];第八屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文集[C];2009年

2 陳立鉆;倪云霞;孫繼軍;范華芬;許安玲;;鐵皮石斛傳統(tǒng)加工品與機械加工品的多糖含量對比研究[A];全國第六屆天然藥物資源學術(shù)研討會論文集[C];2004年

3 郭英英;劉京晶;斯金平;;雁蕩山不同樹種活樹附生鐵皮石斛多糖含量差異比較[A];生態(tài)文明建設中的植物學：現(xiàn)在與未來——中國植物學會第十五屆會員代表大會暨八十周年學術(shù)年會論文集——第4分會場：資源植物學[C];2013年

4 王伯初;李標;;響應聲波加載的鐵皮石斛差異表達基因篩選及其功能初步研究[A];2008年全國生物流變學與生物力學學術(shù)會議論文摘要集[C];2008年

5 丁小余;侯北偉;謝明璐;;珍稀鐵皮石斛基于微衛(wèi)星標記的種質(zhì)鑒別與保護遺傳學研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文集[C];2010年

6 朱波;斯金平;苑鶴;;鐵皮石斛雜交育種的初步研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文集[C];2010年

7 李宏博;張宏宇;樸鐘云;;鐵皮石斛組織培養(yǎng)研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文集[C];2010年

8 斯金平;;鐵皮石斛可持續(xù)發(fā)展關(guān)鍵技術(shù)研究進展[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

9 金璐英;斯金平;張愛蓮;魏濤;莫伊娜;;鐵皮石斛中基本氨基酸含量變異規(guī)律[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

10 張治國;劉驊;夏志俊;王君暉;黃純農(nóng);;鐵皮石斛種子的超低溫保存[A];中國植物生理學會全國學術(shù)年會暨成立40周年慶祝大會學術(shù)論文摘要匯編[C];2003年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 本報記者 王晶晶;鐵皮石斛扎根浙江[N];中國經(jīng)濟導報;2006年

2 施仁潮;鐵皮石斛研究成果驗收[N];科技日報;2006年

3 張文聰;做大鐵皮石斛種植業(yè) 幫助群眾走上致富路[N];韶關(guān)日報;2007年

4 本報記者 何潭振 戴正聰;讓所有老百姓都能吃得起鐵皮石斛[N];中國食品質(zhì)量報;2006年

5 本報記者　 王蔚佳;鐵皮石斛神話如何延續(xù)[N];中國醫(yī)藥報;2006年

6 施文;浙江將出臺鐵皮石斛品種標準[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

7 本報記者 施仁潮;他讓瀕危中藥鐵皮石斛重獲新生[N];中國中醫(yī)藥報;2008年

8 中華中醫(yī)藥學會 莊乾竹;寶寶能喝鐵皮石斛水嗎？[N];健康時報;2008年

9 王英;“工廠”里種出鐵皮石斛[N];蘇州日報;2008年

10 收集整理 軍野;鐵皮石斛的文化淵源[N];世界報;2008年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 孫婧;鐵皮石斛提取物及其活性成分毛蘭素對人乳腺癌細胞抑制作用的研究[D];吉林大學;2016年

2 梁楚燕;基于衰老雌鼠模型探討鐵皮石斛“補腎”功效的科學內(nèi)涵[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

3 徐程;鐵皮石斛種質(zhì)資源與組培工廠化生產(chǎn)研究[D];浙江大學;2006年

4 包英華;鐵皮石斛種質(zhì)資源的鑒定與評價研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2014年

5 嚴亮;中國傳統(tǒng)蘭科藥用植物鐵皮石斛基因組及其生物學特性研究[D];吉林大學;2014年

6 侯北偉;珍稀鐵皮石斛的譜系地理學及保護遺傳學研究[D];南京師范大學;2014年

7 張澤錦;鐵皮石斛的光合碳同化途徑及其對環(huán)境變化的生理響應[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2014年

8 趙興兵;超微鐵皮石斛對脾虛便秘小鼠腸道微生物的影響研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2014年

9 李標;聲波刺激對鐵皮石斛生長代謝的影響及其相關(guān)基因表達和克隆研究[D];重慶大學;2007年

10 靳如意;新型含N雜環(huán)化合物的合成、生物活性及量化計算[D];西北大學;2015年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 張佳星;白術(shù)、鐵皮石斛和杭白菊6種病害的病原鑒定與防治初探[D];浙江農(nóng)林大學;2018年

2 諸燕;鐵皮石斛種質(zhì)資源收集與評價[D];浙江農(nóng)林大學;2010年

3 辛甜;組培鐵皮石斛的品質(zhì)評價研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2011年

4 戴燕萍;鐵皮石斛生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范研究[D];浙江農(nóng)林大學;2012年

5 王俊潔;鐵皮石斛體細胞無性變異的生藥學初步研究[D];云南中醫(yī)學院;2012年

6 李東賓;冷脅迫下鐵皮石斛抗寒基因的克隆與表達研究[D];浙江農(nóng)林大學;2013年

7 馮云;鐵皮石斛儲藏與加工特性研究[D];華南理工大學;2015年

8 鄧星燕;鐵皮石斛紫外指紋圖譜研究[D];云南民族大學;2015年

9 朱夢麗;鐵皮石斛甘露糖結(jié)合凝集素的分子建模與對接研究，及NAC基因組序列的克隆[D];西南交通大學;2015年

10 陳爾;鐵皮石斛組培快繁技術(shù)的優(yōu)化[D];中南林業(yè)科技大學;2015年

本文編號：2757207