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甘肅省部分地區(qū)馬鈴薯瘡痂病病原菌的分離鑒定及其多樣性研究

發(fā)布時間:2020-07-07 16:00
【摘要】:馬鈴薯瘡痂病(PCS)是由病原性鏈霉菌引起的植物病害,可導(dǎo)致塊莖植物產(chǎn)生痂狀病斑,使馬鈴薯質(zhì)量顯著下降,在世界范圍內(nèi)廣泛傳播。在我國,馬鈴薯產(chǎn)業(yè)不斷發(fā)展,但是馬鈴薯瘡痂病發(fā)病面積逐年擴(kuò)大,已對馬鈴薯及其相關(guān)產(chǎn)業(yè)造成了重要影響。本研究主要對采集于甘肅部分地區(qū)(武威、張掖、白銀、平?jīng)、天水、隴南)的馬鈴薯樣品進(jìn)行處理,分離得到鏈霉菌,進(jìn)行致病性驗(yàn)證及生理生化檢測,從而系統(tǒng)的分析了該地區(qū)馬鈴薯瘡痂病的致病菌類型,為相關(guān)地區(qū)進(jìn)行馬鈴薯瘡痂病的防治提供了一定的理論依據(jù)。主要研究結(jié)果有:在張掖、白銀、平?jīng)、天水、隴南、天水地區(qū)共采集了53個馬鈴薯樣品。經(jīng)過分離純化,得到246株放線菌,其中含有致病性基因的鏈霉菌有67株,占全部鏈霉菌的27.24%。通過對致病基因島(PAI)三個主要致病基因(txtAB、nec1、tomA)的PCR擴(kuò)增檢測發(fā)現(xiàn),以上地區(qū)的馬鈴薯瘡痂病病原菌PAI類型具有一定的多樣性,其致病基因類型分別為txtAB~+/nec1~+/tomA~+(65株)、txtAB~+/nec1~-/tomA~+(1株)和txtAB~-/nec1~-/tomA~+(1株)。經(jīng)過16S rDNA測序并進(jìn)行系統(tǒng)鑒定可知,張掖地區(qū)主要致病菌為S.galilaeus,武威地區(qū)主要致病菌為S.bobili、白銀地區(qū)主要致病菌為S.bobili、S.galilaeus,平?jīng)、天水地區(qū)主要致病菌為S.scabies、隴南地區(qū)主要致病菌為S.galilaeus。對分離出的部分病原菌進(jìn)行致病性驗(yàn)證,結(jié)果顯示16#、73#、76#(txtAB~+/nec1~-/tomA~+)、93#、156#、214#菌株均能在小薯片上產(chǎn)生明顯侵染現(xiàn)象,抑制蘿卜苗的生長;而31#菌(txtAB~-/nec1~-/tomA~+)未產(chǎn)生明顯侵染現(xiàn)象,在蘿卜幼苗抑制試驗(yàn)中,對蘿卜苗抑制率最低。本研究通過盆栽回接試驗(yàn)證明16#、73#、76#、93#、156#、214#菌均可使試驗(yàn)馬鈴薯塊莖產(chǎn)生不同程度的病變,其中156#菌處理組致病率最高,為97.03%,該菌致病性良好;31#菌處理組未見到明顯病斑,試驗(yàn)結(jié)果證明該菌株沒有瘡痂病致病能力。結(jié)合16S rDNA測序和生理生化試驗(yàn),可以確定,31#菌為S.bottropensis,156#菌為S.bobili,16#、76#和93#菌菌為S.galilaeus;由于S.europaeiscabiei和S.scabies的16S rDNA具有較高的相似性,在進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析的基礎(chǔ)上,結(jié)合ITS特異性序列檢測結(jié)果,進(jìn)一步確定73#和214#菌為S.scabies。
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S435.32
【圖文】:

基因擴(kuò)增


圖 3-1 txtAB 基因擴(kuò)增結(jié)果0 DNAMarker;(1)ACCC41024T;(2)CGMCC4.1669T;(3)16#;(4)31#;(8)156#;(9)214#。Fig. 3-1 txtAB gene amplification resultsNA Marker, (1) ACCC41024T, (2) CGMCC4.1669T, (3) 16#, (4) 31#, (5) 73#, (6) 76#, (7)圖 3-2 nec1 基因擴(kuò)增結(jié)果0 DNAMarker;(1)ACCC41024T;(2)CGMCC4.1669T;(3)16#;(4)31#;(

基因擴(kuò)增


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基因擴(kuò)增,病原菌


圖 3-3 tomA 基因擴(kuò)增結(jié)果0 DNAMarker;(1)ACCC41024T;(2)CGMCC4.1669T;(3)16#;(4)31#;((8)156#;(9)214#。Fig. 3-3 tomA gene amplification resultsNA Marker, (1) ACCC41024T, (2) CGMCC4.1669T, (3) 16#, (4) 31#, (5) 73#, (6) 76#, (7、3-2 和 3-3 可知該地區(qū)病原菌的 PAI 類型具有一定的多樣性omA+(16#、73#、93#、156#、214#)、txtAB+/nec1-/tomA+omA+(31#)三種類型。表 3-3 各地區(qū)病原菌篩出結(jié)果Table 3-3 Screening results of pathogens in various regions地區(qū)Area病原菌(株)Pathogenic bacteria(Strain)武 威 4張 掖 6白 銀 42平 涼 1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

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本文編號:2745317

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