發(fā)布時(shí)間：2020-06-06 06:04

【摘要】：家蠶核型多角體病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是蠶業(yè)生產(chǎn)中危害最嚴(yán)重的病原微生物,是桿狀病毒科核型多角體病毒屬的代表成員,因此是目前研究比較多的昆蟲桿狀病毒。盡管目前關(guān)于BmNPV的感染機(jī)制已有大量的研究成果,但是針對(duì)于病毒粒子BV具體的感染過程仍然存在許多問題需要進(jìn)一步探討,本論文主要是對(duì)量子點(diǎn)標(biāo)記BmNPV病毒粒子BV,GP64信號(hào)肽差異作了進(jìn)一步的研究,以揭示BmNPV GP64的N端信號(hào)肽介導(dǎo)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)、分泌,C端的跨膜域使其錨定在細(xì)胞膜上的特性,為后期實(shí)驗(yàn)研究BmNPV BV出入宿主細(xì)胞的具體途徑提供參考。第一章簡介:以綜述的形式介紹了桿狀病毒的分類、感染機(jī)制、表達(dá)系統(tǒng)、其他應(yīng)用;量子點(diǎn)的優(yōu)點(diǎn)、應(yīng)用;重點(diǎn)介紹了桿狀病毒BmNPV和AcMNPV入侵宿主細(xì)胞國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀。第二章構(gòu)建量子點(diǎn)標(biāo)記的BmNPV病毒粒子:首先構(gòu)建了生物素化的重組桿狀病毒,其次是量子點(diǎn)標(biāo)記、示蹤單病毒,分析病毒粒子侵染宿主細(xì)胞的過程。進(jìn)行量子點(diǎn)標(biāo)記的過程我們發(fā)現(xiàn):AcMNPV的量子點(diǎn)標(biāo)記方法并不適用BmNPV病毒標(biāo)記及示蹤研究。第三章不同長度GP64信號(hào)肽重組桿狀病毒分析:我們前期研究發(fā)現(xiàn)BmNPV GP64囊膜蛋白在后期加工過程中信號(hào)肽并沒有發(fā)生切割,推測BmNPV GP64蛋白后期分泌的途徑不同于生物素分泌的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體途徑,所以我們對(duì)BmNPV GP64信號(hào)肽序列特性分析,發(fā)現(xiàn)不同長度GP64信號(hào)肽的重組病毒,感染性有很大差異,免疫熒光分析發(fā)現(xiàn)完整信號(hào)肽的GP64定位在細(xì)胞質(zhì)膜上。第四章不同長度GP64信號(hào)肽引導(dǎo)eGFP定位分泌差異分析:基于上一章的研究結(jié)果,不同GP64信號(hào)肽的桿狀病毒特性的差異。我們利用不同長度信號(hào)肽+eGFP+TMD,模擬膜蛋白GP64,通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,分析不同信號(hào)肽引導(dǎo)eGFP在胞內(nèi)的定位,進(jìn)一步研究不同信號(hào)肽引導(dǎo)蛋白的定位分泌途徑的不同,將更好解釋AcMNPV和BmNPV標(biāo)記方法不同的原因,為BmNPV病毒粒子進(jìn)出宿主細(xì)胞的具體途徑提供基礎(chǔ)。通過上述研究,我們成功構(gòu)建了多種標(biāo)記的病毒,首次揭示了BmNPV GP64可能不同于傳統(tǒng)的分泌途徑,為進(jìn)一步研究BmNPV出入宿主細(xì)胞的過程提供了新的參考。
【學(xué)位授予單位】：江蘇科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S884.51

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 閆曉;;半導(dǎo)體量子點(diǎn)在生物熒光分析中的應(yīng)用[J];生命科學(xué)儀器;2007年07期

2 孟小林,徐進(jìn)平,王健,魯偉;我國病毒殺蟲劑研究與應(yīng)用新進(jìn)展[J];植保技術(shù)與推廣;2002年05期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 梁飛;BmNPV膜融合蛋白GP64作用機(jī)制初步研究[D];江蘇科技大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：2699266