目的：從整體動物、分子生物學(xué)、譜效關(guān)系和藥代動力學(xué)四個方面著手,探討腦健片抗腦缺血損傷的作用規(guī)律。通過建立局灶性腦缺血大鼠模型,研究補(bǔ)陽還五湯精簡方腦健片對腦缺血大鼠腦損傷的保護(hù)作用及對大鼠海馬組織周期蛋白CyclinB1和CyclinB2表達(dá)的影響；結(jié)合Matlab軟件編程分析腦健片藥效成分與腦損傷保護(hù)作用之間的譜效關(guān)系和藥代動力學(xué)變化,探討補(bǔ)陽還五湯全方和腦健片的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用規(guī)律,并建立了補(bǔ)陽還五湯全方和腦健片的藥代動力學(xué)數(shù)學(xué)模型,為腦健片臨床應(yīng)用的有效性提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依椐。 方法：采用大腦中動脈線栓法建立局灶性腦缺血大鼠模型,將動物隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、補(bǔ)陽還五湯組、腦健片高、中、低劑量組。稱取各組大鼠1d到7d的體重,并將各組大鼠于7d做神經(jīng)功能評分,處理后TTC計(jì)算其梗死面積；于1d、3d、7d、14d、28d取腦組織進(jìn)行WB、RT-PCR實(shí)驗(yàn),檢測其海馬組織周期蛋白Cyclin B1和CyclinB2表達(dá)。運(yùn)用PCA和GRA法對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,獲得補(bǔ)陽還五湯和腦健片指紋圖譜與神經(jīng)功能評分、腦梗死面積、腦干濕比等藥效指標(biāo)和周期蛋白Cyclin B1和Cyclin B2之間關(guān)系,并基于曲線擬合法建立其藥代動力學(xué)數(shù)學(xué)模型。 結(jié)果： (1)結(jié)合卡方擬合優(yōu)度檢驗(yàn)和兩組獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)法,運(yùn)用matlab編程分析的結(jié)果：腦健片組與模型組相比較,大鼠體重、腦干濕重比值明顯增加(P0.05),腦梗死面積(P0.05)明顯降低,且腦健片中劑量組對腦缺血的治療效果最佳,其療效略優(yōu)于補(bǔ)陽還五湯組(正常人體劑量)。 (2)WB和RT-PCR檢測結(jié)果表明：腦健片組與模型組相比較,能有效降低周期蛋白Cyclin B1和Cyclin B2表達(dá),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),腦健片組和補(bǔ)陽還五湯全方組間對Cyclin B1和CyclinB2表達(dá)的調(diào)控作用沒有顯著差異(P0.05)。 (3)譜效關(guān)系研究結(jié)果顯示：腦健片和補(bǔ)陽還五湯樣品共有峰排名均大于其各自的特有峰,且保留時間為tR=20.649、6.474、26.404min的化學(xué)成分對神經(jīng)功能評分、腦梗死面積、腦干濕比、周期蛋白CyclinB1和Cyclin B2的貢獻(xiàn)度排在前五位。 (4)藥代動力學(xué)模型評價的結(jié)果顯示：腦健片和補(bǔ)陽全方對阿魏酸與i辣灸邗サ奈輾植己拖廾饗圓鉅

本文編號：2834962