本文關(guān)鍵詞：蛹蟲草培養(yǎng)及其生理活性物質(zhì)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

中南林業(yè)科技大學(xué)碩士學(xué)位論文，蛹蟲草培養(yǎng)及其生理；表３．１９雄性果蠅０．１５％組生命表；Ｔａｂｌｅ３．１９ＴｈｅｌｉｆｅｔａｂｌｅｏｆＯ；工（ｄ）；Ｏ１０２０３０４０５０６０７０８０；ｍ１００ｌｏｏ９７９３８３６２３３１ｌＯ；１；ｄＩ０Ｏ３７１７３８６７８９１００；ｋ１．０００ｏ．９８５０．９５００．８８００．７；ＴＩ５．５６５４．５６５３．５８０２．６３０

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表３．１９雄性果蠅０．１５％組生命表

Ｔａｂｌｅ３．１９ＴｈｅｌｉｆｅｔａｂｌｅｏｆＯ．１５％ｇｒｏｕｐｏｆｍａｌｅｆｒａｉｔｔｌｙ

工（ｄ）

Ｏ１０２０３０４０５０６０７０８０

ｍ１００ｌｏｏ９７９３８３６２３３１ｌＯ

１。Ｌ００１．ｏｏＯ．９７０．９３０．８３Ｏ．６２ｏ．３３Ｏ．１ｌ０．００

ｄＩ０Ｏ３７１７３８６７８９１００

ｋ１．０００ｏ．９８５０．９５００．８８００．７２５０．４７５ｏ．２２００．０５５

ＴＩ５．５６５４．５６５３．５８０２．６３０１．７５０１．０２５Ｏ．５５００．３３０

ｅｚ

５．５６５４．５６５３．６９ｌ２．８２８２．１０８１．６５３１．６６７

３．０００

附注：Ｉ表示年齡階段（單位，ｄ）ｆｎ。表示各年齡開始的存活數(shù)日ｌｌＩ表示各年齡開始的存活

分?jǐn)?shù)；ｄ。表示各年齡死亡個體數(shù)；ｋ表示各年齡期中平均存活分?jǐn)?shù)；Ｔｌ表示各年齡期所有個體存活的總個體分?jǐn)?shù)｛ｅＩ表示生命期望．

３．４．４．２雌性果蠅的生命期望比較

表３．２０雌性果蠅的生命期望比較

Ｔａｂｌｅ３．２０Ｔｈｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｌｉｆｅｅｘｐｅｃｔａｔｉｏｎｏｆｆｅｍａｌｅｆｒｕｉｔｔｌｙ

年齡（ｄ）

Ｏ１０２０３０４０５０６０７０８０

Ｋ４．５１０３．６７７２．７４５２．３５ｌ１．６０８０．９１２０．５００

Ｅ１６．０６０５．０６０４．１０６３．１４３２．１９８１．５６３１．００００．６６７０．５００

Ｅ１／Ｋ

１．３４３７１．３８２５Ｉ．４９５８１．３３６９１．３６６９１．７１３８２．０００

Ｅ２４．５１０３．５５０２．８１９１．９８２１．３０００．９７４０．７８６０．５００

附注：Ｋ：對照組生命期望；Ｅｌ：Ｏ．１５％組生命期望；Ｅ２：２．４０９６組生命期望。

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生命期望ｅＩ是指進(jìn)入ｘ年齡期的生物個體，平均地還能活多長時間的估計值．從表３．２０雌性果蠅的生命期望比較表可以看出，蛹蟲草多糖的Ｏ．１５％濃度組在果蠅的各個年齡階段的生命期望值都比對照組相應(yīng)的年齡階段要高出３０％以上，５０ｄ年齡組高

出７０％多；６０ｄ年齡組則高出ｌ００９６。

從表３．１０可知，雌性果蠅０．１５％濃度組的最高壽命達(dá)到了８０．ｏｏ±３．９７ｄ；而對照組在６０ｄ的生命期望值為０．５，最高壽命為６５．７０±１．７０ｄ。說明０．１５％的蛹蟲草多糖對雌性果蠅的壽命影響是非常明顯的。２．４０９６組的生命期望值在早期年齡階段與對照組雖然沒有較大的差異，但是在５０ｄ以后，生命期望都比對照組高，表示這個濃度對老齡果蠅的生命有顯著的促進(jìn)作用，具有延壽作用．

表３．２０結(jié)果還顯示，不同濃度組的生命期望值不一樣，說明低濃度的蛹蟲草多糖對果蠅壽命的影響大于高濃度。這與前面的分析結(jié)果相符。

３．４．４．３雄性果蠅的生命期望比較

表３．２１雄性果蠅的生命期望比較

Ｔａｂｌｅ３．２１Ｔｈｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｌｉｆｅｅｘｐｅｃｔａｔｉｏｎｏｆｍａｌｅｆｒｕｉｔｆｌｙ

年齡（ｄ）

０１０２０３０４０５０６０７０

Ｋ４．７６０３．９８４３．０９８２．３１２１．６６９１．１２７０．７８００．５００

Ｅ１Ｅ２

５．５６５４．５６５３．６９１２．８２８２．１０８１．６，５３１．６６７３．０００

４．９１０４．０９４３．２１０２．４６５１．９５６１．３６８１．０８６０．５００

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從表３．２１雄性果蠅的生命期望比較表可見，蛹蟲草多糖的ｏ．１５％濃度組和２．４０％濃度組在果蠅的各個年齡階段的生命期望值也都比對照組相應(yīng)的年齡階段要高，而且在７０ｄ年齡階段以后，ｏ．１５％濃度組的果蠅生命期望值為３，而對照組在？Ｏｄ

年齡階段的生命期望值則只有０．５．，從表３．１１ｎ－Ｉ知，雄性果蠅Ｏ．１５％濃度組的最高壽命達(dá)到了７４．１０＋２．５６ｄ，說明蛹蟲草多糖對雄性果蠅壽命的影響也是很明顯的。

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第４章討論與結(jié)論

４．１蛹蟲草子實體培養(yǎng)技術(shù)和蟲草素生產(chǎn)技術(shù)

實驗表明：蛹蟲草在不同的發(fā)育階段對環(huán)境因子的要求不同，在菌絲體生長階段需要黑暗條件，而子實體則涉及光形態(tài)建成，其分化生長都需要一定的光照．另外，子實體中蟲草素的含量與溫度和光照強度成正相關(guān)。蛹蟲草生長發(fā)育的適宜溫

度是１７－２５＂Ｃ，子實體生長的最適溫度是２２℃；蛹蟲草菌絲體生長要求黑暗的無光條

件，子實體分化形成要求光強在１５０ＬＸ以上，日光燈強光對子實體的生長發(fā)育沒有不良影響；自然光強度與子實體的生物量成負(fù)相關(guān)；子實體的生長過程中，日光燈光照強度、溫度與子實體的蟲草素含量成正相關(guān)；在予實體的生長發(fā)育過程中，增加黑暗處理可增加子實體重量和直徑。為實現(xiàn)子實體高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的目的，建議首先在黑

暗的前提下，以最適溫度培養(yǎng)菌絲體，然后在適當(dāng)?shù)墓庹諚l件和最適溫度下誘導(dǎo)子

實體分化，接著在最適溫度下增加黑暗條件處理以增加子實體重量，最后提高培養(yǎng)

溫度和連續(xù)強光處理以增加蟲草素的含量。

因為蛹蟲草是變溫生物，其生長發(fā)育受環(huán)境因子的制約，環(huán)境因子主要通過影

響生物的基因表達(dá)和新陳代謝來影響生長發(fā)育。對交溫生物而言，溫度是最關(guān)鍵的因素，任何生物都有一個最適溫度，因此在蛹蟲草子實體的培養(yǎng)過程中，溫度控制在最適溫度是必須的。

光照是影響蛹蟲草生長發(fā)育和分化的又一重要環(huán)境因子．在菌絲體生長階段需要黑暗條件，這是蛹蟲草對環(huán)境條件長期適應(yīng)的結(jié)果．而在子實體形成過程，則涉及光形態(tài)建成，其分化生長都需要一定的光照的誘導(dǎo)。利用黑暗條件有利蛹蟲草菌絲體生長的特性，在子實體接近成熟時，再給以黑暗條件，便可在子實體上生長菌

絲體，從而增加子實體的重量．

因此在生產(chǎn)過程中，通過控制光溫條件，就能高產(chǎn)的培養(yǎng)出優(yōu)質(zhì)的蛹蟲草子實

體。

蟲草素是蛹蟲草的代謝產(chǎn)物，對蛹蟲草本身的生物學(xué)意義尚無報道．由于蟲草

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素在醫(yī)藥上和分子生物學(xué)的重大意義而備受關(guān)注。Ｉ．覷ａｎｏｌｌ和Ｓｕｈａｄｏｌｎｉｋ‘１刪用Ｕ－１４Ｃ腺苷和３－３Ｈ核糖研究了蛹蟲草體內(nèi)蟲草素的生物合成過程，他們發(fā)現(xiàn)蟲草素（３’一脫氧腺苷＞的形成機(jī)制是一種與２’一脫氧核酸’（２＇－＆ｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）形成機(jī)理相似的還原機(jī)制。我們的研究發(fā)現(xiàn)蛹蟲草子實體中蟲草素的含量與溫度和光照強度成正相關(guān)．此外我們還發(fā)現(xiàn)蛹蟲草子實體顏色和黃色類物質(zhì)與光照強度和光照時間成正相關(guān)，這與綠色植物的保護(hù)性如胡蘿ｈ素、葉黃素等與光照的關(guān)系相似。由此可以推測蟲草素的合成是由某一基因控制的，被溫度或強光直接誘導(dǎo)或受高溫或光照下產(chǎn)生某種的物質(zhì)誘導(dǎo)而表達(dá)，因而推測蟲草素在高溫和強光下的大量產(chǎn)生可能是蟲草

的保護(hù)性機(jī)制。

因此，蛹蟲草高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的生產(chǎn)技術(shù)的要點是：

在蛹蟲草生長發(fā)育初期，適宜溫度設(shè)定在１７－２５＂（２，，在無光條件下培養(yǎng)至菌絲體長滿培養(yǎng)基，然后用光強為１５０ｕ【的光照誘導(dǎo)子實體分化，并在子實體生長的最適溫度２２＂Ｃ下培養(yǎng)ｌＯｄ左右，同時逐漸加強光照至１５００ＬＸ，在培養(yǎng)過程中避免自然光照；待子實體成形后，加強光照強度至３０００ＬＸ，培養(yǎng)１０ｄ｝接著關(guān)掉光源，在黑暗條件下培養(yǎng)ｌＯｄ。并降溫到２０＂（２，以增加子實體重量和直徑．最后強光下５０００ＬＸ，溫度２５℃下培養(yǎng)ｌＯｄ．這樣可得到粗壯且蟲草素含量高的優(yōu)質(zhì)子實體。

４．２蛹蟲草液體深層培養(yǎng)技術(shù)

蛹蟲草多糖是蛹蟲草中最主要的有效成分之一．采用液體深層發(fā)酵方法既可以

快速生產(chǎn)蛹蟲草菌絲體，也可以獲得發(fā)酵液，同時還可以改進(jìn)工藝參數(shù)，優(yōu)化培養(yǎng)條

件。富集目的生理活性物質(zhì)，提高生物活性物質(zhì)的含量，方便目的組分的提取。我們通過三因素三水平的正交試驗，研究了不同碳源、不同氮源和不同的培養(yǎng)溫度對蛹蟲草培養(yǎng)液和菌絲體中蟲草多糖含量的影響，從而確定了蛹蟲草菌絲體、總多糖，

胞外多糖以及胞內(nèi)多糖發(fā)酵的最佳碳氮源及其最適溫度。

在菌絲體液體培養(yǎng)過程中，碳源、氮源、溫度三個因素對蛹蟲草菌絲體的生物學(xué)特性以及對生理活性物質(zhì)蟲草多糖的含量有顯著影響：蛹蟲草菌絲體的生長可以利用不同濃度的碳源和氮源，其中在以碳源為６％、氮源為１％的液體培養(yǎng)基中生長最

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