本文關鍵詞：BCR-ABL融合基因檢測試劑盒質(zhì)控品的建立

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【摘要】：目的:建立BCR-ABL融合基因質(zhì)控品,評價人類BCR-ABL融合基因突變檢測試劑盒的性能。方法:根據(jù)人類BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因m RNA序列,設計覆蓋斷裂點序列,合成目的融合基因序列。用限制性內(nèi)切酶BglⅡ和HindⅢ對含有目的融合基因的質(zhì)粒和表達載體進行酶切,連接酶切產(chǎn)物。將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細胞,篩選單個陽性菌落進行驗證。將正確的單個菌落進行超聲誘導,制備假病毒溶液。用熒光逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)法對假病毒溶液提取的RNA進行檢測。結果:PCR結果和測序結果表明成功構建人類BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒質(zhì)粒;熒光RT-PCR結果表明構建的e1a2和e14a2型假病毒質(zhì)粒能夠表達目的 RNA,并且能被市售試劑盒正確檢出,可以作為RNA質(zhì)控品。結論:本研究建立人類BCR-ABL融合基因RNA質(zhì)控品,用于評價BCR-ABL融合基因突變檢測試劑盒的性能,為BCR-ABL融合基因相關白血病的臨床診斷及靶向治療提供指導。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院;河南省醫(yī)療器械檢驗所;中國科學院北京基因組研究所;大連晶泰醫(yī)學檢驗所;
【關鍵詞】： 靶向藥物 分子靶向治療 慢性粒細胞白血病標志物 埃布爾森小鼠白血病病毒癌基因同源物 BCR-ABL 融合基因 RNA檢測 熒光逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應 基因檢測試劑 標準物質(zhì)研究
【分類號】：R440
【正文快照】： BCR-ABL;融合基因;RNA檢測;熒光逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應;基因檢測試劑;標準物質(zhì)研究含有表達載體PAR-1的PAR-1/DH5α菌種,中國科學院北京基因組研究所;T4 DNA連接酶、限制性內(nèi)切酶BglⅡ和HindⅢ,美國New England Biolabs公司;TRIzol提取液,美國Invitrogen公司;2×GC buffer、Taq

【相似文獻】

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1 黃明,楊桂斌;長期生存的急性早幼粒細胞白血病PML/RARα融合基因的變化及意義[J];白血病.淋巴瘤;2004年01期

2 朱曉華;高怡瑾;楊毅;吳s，

本文編號：998821