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番茄獨(dú)腳金內(nèi)酯合成關(guān)鍵基因CCD7、CCD8 RNA沉默載體的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2017-10-09 00:03

  本文關(guān)鍵詞:番茄獨(dú)腳金內(nèi)酯合成關(guān)鍵基因CCD7、CCD8 RNA沉默載體的構(gòu)建


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【摘要】:根據(jù)已知的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)CCD7和CCD8基因的序列設(shè)計(jì)特異性引物,采用RT-PCR克隆CCD7和CCD8基因片段,通過特定酶切將2個(gè)基因進(jìn)行拼接,再將串聯(lián)基因以反向重復(fù)的方式連入p UCCRNAi載體,并定向插入到p35植物表達(dá)載體上。結(jié)果表明,克隆獲得了大小約為400 bp的CCD7和CCD8基因片段,基因片段拼接后獲得800 bp左右的串聯(lián)片段CCD7-8;將該基因片段插入p UCCRNAi載體后得到1 700 bp大小的含Intron的反向重復(fù)序列In-7-8,并成功插入到植物表達(dá)載體p35中,通過酶切分析,RNAi載體構(gòu)建正確。最終成功構(gòu)建了番茄CCD7和CCD8 2個(gè)串聯(lián)基因的RNA沉默表達(dá)載體p35-In-7-8。
【作者單位】: 新疆綠洲農(nóng)業(yè)病蟲害治理與植保資源利用自治區(qū)高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】番茄(Lycopersicon esculentum Mill.) 獨(dú)腳金內(nèi)酯 列當(dāng) 類胡蘿卜素裂解雙加氧酶(CCD)和(CCD) RNA沉默載體
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31460467)
【分類號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 列當(dāng)(Orobanche coerulescens Steph.)是一類無葉綠素并以全寄生方式寄生于其他植物根部獲取所需養(yǎng)分的植物,其可寄生在茄科、豆科、菊科、傘形科、葫蘆科等多種重要經(jīng)濟(jì)作物上,造成寄主植物減產(chǎn)5%~100%,已在亞洲、歐洲、非洲、南美洲和北美洲的較多國家和地區(qū)發(fā)生,每年給農(nóng)業(yè),

本文編號(hào):997000

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