本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌lpp20基因在食品級乳酸菌中的表達(dá)及免疫活性鑒定

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【摘要】：目的:構(gòu)建分泌表達(dá)幽門螺桿菌lpp20基因的重組乳酸乳球菌菌株,并鑒定其免疫活性,為研究安全高效的幽門螺桿菌口服疫苗奠定基礎(chǔ)。方法:采用PCR法從幽門螺桿菌基因組DNA中擴(kuò)增lpp20基因,將lpp20先與T載體(p MD19-T)連接,進(jìn)而經(jīng)雙酶切與表達(dá)載體p NZ8149-SPusp45連接,用電穿孔法將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入食品級乳酸乳球菌菌株NZ3900中,并用Nisin誘導(dǎo)Lpp20表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物通過Western blot法鑒定免疫活性。結(jié)果:lpp20基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物大小約為540 bp,重組質(zhì)粒的酶切、PCR和測序鑒定結(jié)果符合預(yù)期;在菌體和培養(yǎng)基中均檢出表達(dá)的Lpp20蛋白,重組表達(dá)的Lpp20蛋白相對分子質(zhì)量約為20 000,且具有與小鼠抗幽門螺桿菌血清反應(yīng)的免疫活性。結(jié)論:成功構(gòu)建了能夠分泌表達(dá)幽門螺桿菌Lpp20抗原的乳酸乳球菌菌株,該重組菌株在口服疫苗研究中具有應(yīng)用潛力。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)教研室;河南省分子醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 乳酸菌 lpp基因 幽門螺桿菌 分泌表達(dá) 食品級
【基金】：中國博士后科學(xué)基金資助項目20070410252
【分類號】：R392
【正文快照】： #通信作者:張榮光,男,1968年5月生,博士,副教授,研究方向:分子流行病學(xué),E-mail:zrg@zzu.edu.cn;段廣才,男,1958年8月生,博士,教授,研究方向:分子流行病學(xué),E-mail:gcduan@zzu.edu.cn幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是人體胃炎、消化性潰瘍和胃癌等胃部疾病的主要病原

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張榮光,段廣才,范清堂;利用生物信息學(xué)分析幽門螺桿菌Lpp20蛋的化學(xué)和免疫學(xué)分子特征[J];河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2003年04期

2 寧云山;李妍;羅軍;董文其;李明;;幽門螺桿菌Lpp20抗原的原核表達(dá)及其臨床應(yīng)用[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年08期

3 ;[J];;年期

，

本文編號：981711