發(fā)布時間：2017-10-05 09:17

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  更多相關(guān)文章： 重組畢赤酵母 葡萄糖氧化酶 不可折疊蛋白響應(yīng) HAC基因

【摘要】：通過增強(qiáng)不可折疊蛋白質(zhì)響應(yīng)(UPR)信號途徑以及研究不同培養(yǎng)溫度下的影響,來提高重組葡萄糖氧化酶在畢赤酵母中的分泌表達(dá)。影響畢赤酵母外源蛋白表達(dá)的因素,主要為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的折疊速率以及不可折疊蛋白積累造成的胞內(nèi)脅迫壓力。通過共表達(dá)HAC1基因?qū)Σ豢烧郫B蛋白信號通路進(jìn)行調(diào)控,搖瓶中改造菌株P(guān)P-G-HAC1胞外酶活達(dá)到161 U/m L,相比于原始重組葡萄糖氧化酶菌株提高了34%。進(jìn)一步研究不同溫度下過量表達(dá)HAC1基因?qū)甑纳L和分泌外源蛋白的影響,菌株P(guān)P-G-HAC1在3 L發(fā)酵罐中28℃培養(yǎng),酶活達(dá)到1 008 U/m L,胞外重組蛋白質(zhì)達(dá)到14.43 g/L,相比原始菌株在相同條件下提高了3.12倍。
【作者單位】： 江南大學(xué)生物工程學(xué)院;江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室;糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室江南大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 重組畢赤酵母 葡萄糖氧化酶 不可折疊蛋白響應(yīng) HAC基因
【基金】：國家自然科學(xué)基金重大項目(31470160) 國家863計劃項目(2011AA100905) 國家973計劃項目(2013CB733902) 博士后科學(xué)基金項目(114957;2013M540538) 江蘇省自然科學(xué)基金項目(BK2012553)
【分類號】：Q78;Q55
【正文快照】： 葡萄糖氧化酶(EC 1.1.3.4,簡稱GOD)是生物領(lǐng)域中重要的工具酶。它是一種黃素蛋白,可以將β-D-葡萄糖通過分子氧傳遞電子轉(zhuǎn)化為葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖氧化酶被廣泛應(yīng)用于食品、飼料、醫(yī)藥等行業(yè)[1]。其中在醫(yī)藥和食品領(lǐng)域中的作用尤為重要。在醫(yī)藥領(lǐng)域中,可制成試劑盒及電

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