扁蓿豆SK2型脫水素基因MrDHN3的異源表達(dá)提高大腸桿菌對鹽和高溫脅迫的抗性
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【摘要】:扁蓿豆為高原高寒地區(qū)優(yōu)質(zhì)豆科牧草,具有極強(qiáng)的抗旱、耐寒、抗鹽堿的能力。脫水素(DHNs)是參與植物逆境應(yīng)答的一類蛋白。根據(jù)前期RNA-seq的結(jié)果,從扁蓿豆幼苗中克隆到一個編碼脫水素的基因MrDHN3。序列分析顯示該基因含666bp的開放閱讀框,編碼221個氨基酸,為一個SK2型酸性脫水蛋白。氨基酸序列比對結(jié)果表明,MrDHN3與豆科植物白三葉和蒺藜苜蓿相似性最高,達(dá)83%。實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果顯示,MrDHN3基因受脫水、低溫、高鹽和脫落酸處理誘導(dǎo)表達(dá),表明MrDHN3參與了扁蓿豆的非生物脅迫響應(yīng)。通過構(gòu)建原核表達(dá)載體,在大腸桿菌中過表達(dá)MrDHN3蛋白,檢測重組菌在鹽和高溫脅迫處理下的生長存活情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在0.5mol/L NaCl和0.5mol/L KCl高鹽脅迫條件下,重組大腸桿菌的存活率明顯高于對照菌株;在55℃高溫脅迫條件下,轉(zhuǎn)化大腸桿菌的生長狀態(tài)明顯優(yōu)于對照。表明MrDHN3對鹽和高溫引起的細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。為今后作物抗逆性遺傳改良的研究提供了有用信息。
【作者單位】: 中國科學(xué)院西北高原生物研究所高原適應(yīng)與進(jìn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 脫水素基因 非生物脅迫 異源表達(dá) 扁蓿豆
【基金】:青海省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃(2014-ZJ-764) 中科院“西部之光”聯(lián)合學(xué)者項(xiàng)目和中科院科技服務(wù)網(wǎng)絡(luò)計劃(KFJ-SW-STS-177)資助
【分類號】:S541.9
【正文快照】: 高鹽、低溫和干旱等環(huán)境脅迫是影響植物生長發(fā)育和產(chǎn)量的主要因素,植物作為固著的生物,在長期的進(jìn)化過程中逐漸演化出了一系列應(yīng)答機(jī)制[1]。其中,脫水蛋白作為一類重要的響應(yīng)蛋白,在高鹽、低溫、干旱等脫水的環(huán)境脅迫信號刺激及外源ABA處理下積累表達(dá)[2]。脫水蛋白屬于晚期胚
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,本文編號:968377
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