本文關(guān)鍵詞：家蠶保幼激素信號(hào)途徑中轉(zhuǎn)錄因子BmKr-h1的基因克隆與表達(dá)分析

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【摘要】：Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子,在昆蟲變態(tài)發(fā)育中起重要作用。從家蠶5齡第3天幼蟲的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,該基因全長(zhǎng)c DNA為1 918 bp,其中開放閱讀框1 047 bp,GC含量42.2%,編碼348個(gè)氨基酸。氨基酸序列比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)大部分昆蟲物種的Kr-h1都含有8個(gè)鋅指結(jié)構(gòu),暗示該蛋白質(zhì)的功能具有一定的保守性。通過生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)Bm Kr-h1不含信號(hào)肽和糖基化位點(diǎn),但含有19個(gè)可能的磷酸化位點(diǎn),暗示其活性可能受到磷酸化和去磷酸化修飾的影響。利用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)獲得了可溶的Bm Kr-h1蛋白并制備了抗體。Western blot和半定量RT-PCR檢測(cè)的結(jié)果顯示,不論在mRNA水平還是蛋白質(zhì)水平,Bm Kr-h1在家蠶幼蟲5齡初期和吐絲期的翅原基都有較高水平表達(dá),而在蛹期的表達(dá)量較低。用保幼激素(JH)類似物Methoprene和蛻皮激素(20E)分別注射家蠶5齡第3天幼蟲,發(fā)現(xiàn)2種激素均能誘導(dǎo)蠶體內(nèi)Bm Kr-h1的表達(dá)上調(diào)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,Bm Kr-h1在5齡第3天幼蟲各組織中的表達(dá)量很低,而在吐絲期的中腸、脂肪體和表皮中都有一定水平的表達(dá),暗示其可能參與家蠶蛻皮變態(tài)的過程。上述結(jié)果表明Bm Kr-h1可以響應(yīng)JH和20E的誘導(dǎo),提示其在家蠶的變態(tài)發(fā)育中發(fā)揮作用。
【作者單位】： 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 廣州市昆蟲發(fā)育調(diào)控與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 家蠶 保幼激素信號(hào)途徑轉(zhuǎn)錄因子 基因克隆 序列結(jié)構(gòu) 誘導(dǎo)表達(dá)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No.31330071);國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(No.31301918)
【分類號(hào)】：S881.2;Q78
【正文快照】： 全變態(tài)昆蟲一生經(jīng)歷卵-幼蟲-蛹-成蟲的變化過程,各發(fā)育階段的蟲體在外部形態(tài)上有著明顯的區(qū)別。其中,昆蟲蛻皮和變態(tài)的過程是由體內(nèi)的蛻皮激素(ecdysteroids,20E)與保幼激素(juvenilehormone,JH)共同調(diào)控。目前,對(duì)于蛻皮激素的信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制的研究已經(jīng)相對(duì)清楚[1],而保幼激

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李勝,蔣容靜,曹梅訊;保幼激素的代謝[J];昆蟲學(xué)報(bào);2004年03期

2 嵇保中;劉曙雯;田鈴;郭同斌;金鳳;高潔;;保幼激素分析方法研究進(jìn)展[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

3 劉艷;勝振濤;蔣容靜;黃原;李勝;;保幼激素合成的研究進(jìn)展[J];昆蟲學(xué)報(bào);2007年12期

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5 王宗舜,鄭文惠,郭郛;蓖麻蠶蛹期血淋巴中保幼激素滴度的測(cè)定[J];科學(xué)通報(bào);1988年15期

6 司麗琴;昆蟲保幼激素的研究方法[J];煙臺(tái)師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1990年02期

7 馮從經(jīng),戴華國(guó),武淑文;高溫對(duì)褐飛虱體內(nèi)保幼激素酯酶活性的影響[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年02期

8 李紅梅;程登發(fā);田U，

本文編號(hào)：955958