本文關鍵詞：利用PMI選擇標記進行楊樹轉基因體系的研究

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【摘要】：[目的]利用不同于抗生素的PMI為選擇標記基因的遺傳轉化體系,對楊樹進行雙抗蟲基因(Bt和Cp TI)的轉基因研究。建立楊樹以PMI為安全標記基因的轉基因體系,為安全、高效的林木轉基因育種研究提供實驗依據。[方法]選擇已有的轉Cp TI抗蟲基因(利用Kmr選擇標記獲得)的美洲黑楊雜種優(yōu)良無性系南林895楊(Populus×euramericana‘Nanlin895’)為受體材料,對楊樹葉片、葉片分化芽、莖段生根的甘露糖敏感性等篩選優(yōu)化,采用農桿菌介導的方法進行雙抗蟲基因的研究。[結果]較為適合的楊樹葉片篩選培養(yǎng)基為:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1);葉片分化芽篩選培養(yǎng)基為:甘露糖10 g·L~(-1)和蔗糖20 g·L~(-1);莖段生根篩選培養(yǎng)基:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1)。在此基礎上,獲得了轉Bt和Cp TI雙抗蟲基因的植株8株。[結論]初步建立了以PMI為安全標記基因的楊樹轉基因體系:確定了PMI篩選的最適選擇壓,成功構建了含PMI選擇標記基因的植物抗蟲表達載體,通過農桿菌介導的遺傳轉化最終獲得了轉雙抗蟲基因植株。
【作者單位】： 南京林業(yè)大學南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心;無錫市林木種苗管理站;南京曉莊學院生命科學系;
【關鍵詞】： PMI 選擇標記 南林楊 轉基因體系 抗蟲
【基金】：國家科技部“863計劃”課題(2013AA102703) 國家國際科技合作專項(2014DFG32440) 江蘇高校優(yōu)勢學科建設工程項目(PAPD)
【分類號】：S792.11
【正文快照】： 隨著基因工程的不斷發(fā)展,轉基因物種的應用日益增加,轉基因物種釋放后是否會將基因轉移到野生植物中,或是否會破壞自然生態(tài)環(huán)境,打破原有生物種群的動態(tài)平衡。基因工程中普遍使用的選擇標記基因是否安全以及轉基因物種中的選擇標記是否會對環(huán)境產生潛在的負面效應。這些問題已

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