本文關(guān)鍵詞：利用PMI選擇標(biāo)記進(jìn)行楊樹轉(zhuǎn)基因體系的研究

  更多相關(guān)文章： PMI 選擇標(biāo)記 南林楊 轉(zhuǎn)基因體系 抗蟲

【摘要】：[目的]利用不同于抗生素的PMI為選擇標(biāo)記基因的遺傳轉(zhuǎn)化體系,對楊樹進(jìn)行雙抗蟲基因(Bt和Cp TI)的轉(zhuǎn)基因研究。建立楊樹以PMI為安全標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因體系,為安全、高效的林木轉(zhuǎn)基因育種研究提供實驗依據(jù)。[方法]選擇已有的轉(zhuǎn)Cp TI抗蟲基因(利用Kmr選擇標(biāo)記獲得)的美洲黑楊雜種優(yōu)良無性系南林895楊(Populus×euramericana‘Nanlin895’)為受體材料,對楊樹葉片、葉片分化芽、莖段生根的甘露糖敏感性等篩選優(yōu)化,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法進(jìn)行雙抗蟲基因的研究。[結(jié)果]較為適合的楊樹葉片篩選培養(yǎng)基為:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1);葉片分化芽篩選培養(yǎng)基為:甘露糖10 g·L~(-1)和蔗糖20 g·L~(-1);莖段生根篩選培養(yǎng)基:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1)。在此基礎(chǔ)上,獲得了轉(zhuǎn)Bt和Cp TI雙抗蟲基因的植株8株。[結(jié)論]初步建立了以PMI為安全標(biāo)記基因的楊樹轉(zhuǎn)基因體系:確定了PMI篩選的最適選擇壓,成功構(gòu)建了含PMI選擇標(biāo)記基因的植物抗蟲表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化最終獲得了轉(zhuǎn)雙抗蟲基因植株。
【作者單位】： 南京林業(yè)大學(xué)南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心;無錫市林木種苗管理站;南京曉莊學(xué)院生命科學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： PMI 選擇標(biāo)記 南林楊 轉(zhuǎn)基因體系 抗蟲
【基金】：國家科技部“863計劃”課題(2013AA102703) 國家國際科技合作專項(2014DFG32440) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項目(PAPD)
【分類號】：S792.11
【正文快照】： 隨著基因工程的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)基因物種的應(yīng)用日益增加,轉(zhuǎn)基因物種釋放后是否會將基因轉(zhuǎn)移到野生植物中,或是否會破壞自然生態(tài)環(huán)境,打破原有生物種群的動態(tài)平衡�；蚬こ讨衅毡槭褂玫倪x擇標(biāo)記基因是否安全以及轉(zhuǎn)基因物種中的選擇標(biāo)記是否會對環(huán)境產(chǎn)生潛在的負(fù)面效應(yīng)。這些問題已

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本文編號：951930