siRNA干擾MTH1基因?qū)Ω伟〩epG2細(xì)胞凋亡和遷移的影響
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【摘要】:目的應(yīng)用siRNA干擾技術(shù)抑制人肝細(xì)胞癌系HepG2細(xì)胞MTH1基因表達(dá),并研究MTH1基因干擾后對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡和遷移能力的影響。方法設(shè)計(jì)并化學(xué)合成3對(duì)特異性MTH1-siRNA,采用陽離子脂質(zhì)體法瞬間轉(zhuǎn)染肝癌HepG2細(xì)胞,離體培養(yǎng)肝癌HepG2細(xì)胞,并設(shè)正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組及MTH1-siRNA1、MTH1-siRNA2、MTH1-siRNA3轉(zhuǎn)染組。采用蛋白印跡(Western blot)法檢測(cè)轉(zhuǎn)染MTH1-siRNA后HepG2細(xì)胞MTH1蛋白水平表達(dá)的變化,并篩選干擾效果最佳序列。運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA-MTH1后HepG2細(xì)胞凋亡、體外遷移能力的變化。結(jié)果 MTH1-siRNA3轉(zhuǎn)染組干擾效果與正常組和陰性對(duì)照組相比效果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002,P=0.005)。MTH1-siRNA3轉(zhuǎn)染組細(xì)胞凋亡率高于正常組及陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.012,P=0.013);MTH1-siRNA3轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的劃痕24、36 h愈合率均低于正常組和陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.000)。結(jié)論 MTH1在肝癌細(xì)胞的凋亡及遷移中起重要作用,干擾MTH1的表達(dá)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡并降低肝癌細(xì)胞的遷移能力。
【作者單位】: 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院腫瘤科;
【關(guān)鍵詞】: 肝細(xì)胞癌 MTH siRNA 凋亡 遷移
【基金】:江西省自然科學(xué)基金(20151BBG70176)
【分類號(hào)】:R735.7
【正文快照】: 科移中起重要作用,干擾MTH1的表達(dá)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡并降低肝癌細(xì)胞的遷移能力。0引言肝細(xì)胞癌惡性程度很高,增殖和轉(zhuǎn)移能力的大小是影響肝癌治療效果和預(yù)后的關(guān)鍵因素。尤其是晚期肝癌由于缺乏有效的治療方法,預(yù)后非常差。近年來分子靶向治療在腫瘤的基礎(chǔ)研究及臨床治療方面
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