本文關鍵詞：中華蜜蜂細胞色素CYP9E2基因克隆及其表達分析

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【摘要】：【目的】克隆中華蜜蜂Apis cerana cerana細胞色素CYP9E2基因的完整編碼區(qū)序列,分析CYP9E2基因在工蜂體內的表達特征,為研究該基因的生物學功能提供理論基礎�！痉椒ā恳越馄诗@得的中華蜜蜂采集蜂中腸組織為材料,提取總RNA。利用RT-PCR技術克隆中華蜜蜂CYP9E2基因的編碼區(qū)。采用多種生物信息學軟件分析該基因的核苷酸和氨基酸序列,利用熒光定量PCR技術(quantitative real-time PCR)分析其在中華蜜蜂工蜂成蟲期不同階段(初生蜂、哺育蜂、守衛(wèi)蜂以及采集蜂)頭部和中腸組織中的相對表達量及在飼喂氟氯苯菊酯后工蜂中腸組織中的表達變化�！窘Y果】克隆獲得中華蜜蜂CYP9E2基因(命名為Ac CYP9E2)mRNA序列,長度為1 600 bp(Gen Bank登錄號:KX394629),編碼區(qū)長1 494 bp,編碼497個氨基酸,其蛋白質分子量為57.026k D,等電點為8.32。系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,中華蜜蜂Ac CYP9E2與西方蜜蜂Apis mellifera、小蜜蜂Apis florea CYP9E2基因聚成一支。對中華蜜蜂工蜂成蟲期不同階段頭部和中腸組織Ac CYP9E2相對表達量測定發(fā)現,該基因在中華蜜蜂工蜂成蟲期不同階段的表達量存在一定差異,其中,采集蜂頭部和中腸組織中Ac CYP9E2相對表達量均顯著高于初生蜂、哺育蜂以及守衛(wèi)蜂(P0.05),而且4個階段工蜂中腸組織中的Ac CYP9E2相對表達量均顯著高于其頭部(P0.05)。飼喂氟氯苯菊酯后,工蜂中腸組織中Ac CYP9E2的相對表達量顯著高于對照組(P0.05)�！窘Y論】推測Ac CYP9E2可能參與了中華蜜蜂機體外源物質的代謝與解毒過程。
【作者單位】： 江西農業(yè)大學蜜蜂研究所;
【關鍵詞】： 中華蜜蜂 工蜂 細胞色素P 基因克隆 基因表達 解毒酶
【基金】：國家自然科學基金項目(31360587) 國家蜂產業(yè)技術體系資助項目(CARS-45-kxj12)
【分類號】：S891
【正文快照】： 蜜蜂是一種高經濟效益和生態(tài)效益的社會性昆蟲,其從事采集活動時需長期暴露在外界環(huán)境中,不可避免會吸收一些植物次生物質以及接觸一些農藥(靳三省和刁青云,2014)。近幾十年來,人們大量使用農藥來防治農業(yè)蟲害與疾病,使蜜蜂在采集過程中很容易接觸這些農藥,導致蜜蜂中毒事件時

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