百合無癥病毒16kD基因的克
發(fā)布時間:2017-09-29 18:32
本文關鍵詞:百合無癥病毒16kD基因的克隆、原核表達及抗血清制備
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【摘要】:以感染百合無癥病毒(LSV)的百合葉片為試材,克隆LSV16 k D基因,連接到原核表達載體p ET-28a(+)上。將獲得的重組質粒p ET-28a(+)+16 k D轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導得到了高效表達的16 k D蛋白,融合蛋白分子量約為20 k D。融合蛋白經過鎳柱純化后作為抗原免疫注射小鼠,制備得到16 k D蛋白抗血清。Western blot分析顯示所制備的抗血清與誘導表達的融合蛋白發(fā)生特異性反應;通過ELISA檢測和RT-PCR檢測百合樣品,證實制備的抗血清與LSV侵染的百合葉片發(fā)生了相同的特異性反應。結果表明,目的蛋白表達成功,所制備的抗血清具有特異性,可用于LSV的快速檢測、免疫組織化學以及16 k D蛋白功能研究。
【作者單位】: 大連理工大學生命科學與技術學院;大連理工大學生命與醫(yī)藥學院;
【關鍵詞】: 百合 百合無癥病毒 k D 基因克隆 原核表達 抗血清制備
【基金】:國家自然科學基金項目(31070621)
【分類號】:S432.41
【正文快照】: 百合無癥病毒(Lily symptomless virus,LSV)為香石竹潛隱病毒屬(Carlavirus),是侵染百合科植物的主要病毒之一。LSV自20世紀40年代被發(fā)現(xiàn)以來(BrierleySmith,1944),世界各地均有大面積的發(fā)生的報道(劉成科等,2005;Kim et al.,2012),成為嚴重危害百合種球生產和鮮切花品質的世,
本文編號:943618
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