發(fā)布時(shí)間：2017-09-29 18:32

  本文關(guān)鍵詞：百合無(wú)癥病毒16kD基因的克隆、原核表達(dá)及抗血清制備

  更多相關(guān)文章： 百合 百合無(wú)癥病毒 k D 基因克隆 原核表達(dá) 抗血清制備

【摘要】：以感染百合無(wú)癥病毒(LSV)的百合葉片為試材,克隆LSV16 k D基因,連接到原核表達(dá)載體p ET-28a(+)上。將獲得的重組質(zhì)粒p ET-28a(+)+16 k D轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)得到了高效表達(dá)的16 k D蛋白,融合蛋白分子量約為20 k D。融合蛋白經(jīng)過(guò)鎳柱純化后作為抗原免疫注射小鼠,制備得到16 k D蛋白抗血清。Western blot分析顯示所制備的抗血清與誘導(dǎo)表達(dá)的融合蛋白發(fā)生特異性反應(yīng);通過(guò)ELISA檢測(cè)和RT-PCR檢測(cè)百合樣品,證實(shí)制備的抗血清與LSV侵染的百合葉片發(fā)生了相同的特異性反應(yīng)。結(jié)果表明,目的蛋白表達(dá)成功,所制備的抗血清具有特異性,可用于LSV的快速檢測(cè)、免疫組織化學(xué)以及16 k D蛋白功能研究。
【作者單位】： 大連理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;大連理工大學(xué)生命與醫(yī)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 百合 百合無(wú)癥病毒 k D 基因克隆 原核表達(dá) 抗血清制備
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31070621)
【分類(lèi)號(hào)】：S432.41
【正文快照】： 百合無(wú)癥病毒(Lily symptomless virus,LSV)為香石竹潛隱病毒屬(Carlavirus),是侵染百合科植物的主要病毒之一。LSV自20世紀(jì)40年代被發(fā)現(xiàn)以來(lái)(BrierleySmith,1944),世界各地均有大面積的發(fā)生的報(bào)道(劉成科等,2005;Kim et al.,2012),成為嚴(yán)重危害百合種球生產(chǎn)和鮮切花品質(zhì)的世，

本文編號(hào)：943618