本文關(guān)鍵詞：ilvBNC操縱子協(xié)同cimA基因過表達(dá)提高Corynebacterium glutamicum YILW L-異亮氨酸產(chǎn)量的研究

  更多相關(guān)文章： L-異亮氨酸 谷氨酸棒桿菌 α-酮基丁酸 啟動子替換 檸蘋酸合成酶

【摘要】：L-異亮氨酸是人和動物八種必需氨基酸之一,在生命活動中具有重要地位。乙酰羥基酸合成酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS)是L-異亮氨酸合成途徑的關(guān)鍵酶(由ilvBN編碼),α-酮基丁酸是L-異亮氨酸合成的重要前體。因此強(qiáng)化ilvBN的表達(dá)以及增加α-酮基丁酸的供應(yīng)理論上可提高L-異亮氨酸的合成。cim A編碼的甲基蘋果酸合成酶可以催化丙酮酸和乙酰-Co A快速生成L-異亮氨酸前體α-酮基丁酸,從而增強(qiáng)主代謝流通量。本文采用基因重組手段將L-異亮氨酸生產(chǎn)菌株Corynebacterium glutamicum YILW ilvBNC操縱子中的啟動子替換為強(qiáng)啟動子Ptac獲得C.glutamicum YILWPtac。搖瓶發(fā)酵結(jié)果顯示該菌株L-異亮氨酸產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率分別較出發(fā)菌株提高了14.8%和18.6%。在此基礎(chǔ)上過表達(dá)cimA基因,獲得C.glutamicum YILWPtacp XMJ19cim A,其L-異亮氨酸酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率分別較出發(fā)菌株提高了14.5%和42.4%。本研究可為氨基酸生產(chǎn)菌株的選育提供依據(jù)。
【作者單位】： 代謝控制發(fā)酵技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室天津市氨基酸高效綠色制造工程實(shí)驗(yàn)室天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院;天津市工業(yè)微生物研究所有限公司;
【關(guān)鍵詞】： L-異亮氨酸 谷氨酸棒桿菌 α-酮基丁酸 啟動子替換 檸蘋酸合成酶
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31300069) 天津市科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(12ZCZDSY01900)
【分類號】：TQ922
【正文快照】： L-異亮氨酸(L-isoleucine,ILE),又名“異白氨酸”,分子式為C6H13NO2,是人和脊椎動物八種必需氨基酸之一,在生命活動中具有重要地位。L-異亮氨酸對激素和蛋白質(zhì)的合成具有重要的調(diào)節(jié)作用,因而被廣泛應(yīng)用與食品、醫(yī)藥保健等行業(yè)。圖1 L-異亮氨酸代謝調(diào)控機(jī)制Fig.1 Metabolic reg

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本文編號：926651