發(fā)布時(shí)間：2017-09-25 18:02

  本文關(guān)鍵詞：羅非魚無乳鏈球菌EsxA基因克隆與原核表達(dá)

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【摘要】：Ⅶ型分泌系統(tǒng)(T7SS)是近年來發(fā)現(xiàn)的分泌系統(tǒng),分泌兩種胞外蛋白,EsxA基因編碼的ESAT6蛋白和EsxB基因編碼的CFP-10蛋白。分泌蛋白具有良好的免疫原性,促進(jìn)細(xì)菌從巨噬細(xì)胞吞噬體逃逸、影響巨噬細(xì)胞凋亡及裂解細(xì)胞等生物學(xué)功能,與致病性密切相關(guān)。以羅非魚源無乳鏈球菌為模板,克隆到294bp的EsxA基因,將目的序列克隆到pMD18-T載體,經(jīng)測(cè)序,目的序列與無乳鏈球菌EsxA基因同源率在99%以上。EsxA基因克隆到pET32a載體中,重組載體在28℃、0.5mmol/L IPTG誘導(dǎo)條件下表達(dá)量最大,可溶性表達(dá)。將純化的ESAT6蛋白免疫Balb/c鼠,成功制備ESAT6蛋白鼠多克隆抗體,經(jīng)Western blot,ESAT6蛋白具有良好的反應(yīng)原性。研究結(jié)果為進(jìn)一步進(jìn)行無乳鏈球菌ESAT6蛋白的免疫學(xué)功能研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物衛(wèi)生研究所/廣東省獸醫(yī)公共衛(wèi)生公共實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： Ⅶ型分泌系統(tǒng) 無乳鏈球菌 EsxA基因 克隆與表達(dá)
【基金】：廣東省海洋漁業(yè)局科技與產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)(A201401C06) 廣州市農(nóng)業(yè)科技攻關(guān)項(xiàng)目(GZCQC1202FG04002-01) 廣州市科技攻關(guān)項(xiàng)目(2014J4100229)
【分類號(hào)】：S943
【正文快照】： Ⅶ型分泌系統(tǒng)(typeⅦsecretion system,T7SS)由多種組分構(gòu)成,分泌兩種具有免疫原性的胞外蛋白,即EsxA基因編碼的早期分泌抗原靶6(earlier secreted antigen target 6,ESAT6)和EsxB基因編碼的培養(yǎng)濾液蛋白10(culture filter protein10,CFP-10)。它們具有良好的免疫原性,能改變

【相似文獻(xiàn)】

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10 祝t熈，

本文編號(hào)：918756