豬傳染性胃腸炎病毒的分離鑒定及其S基因分子生物學特征的分析
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【摘要】:為了解目前流行的豬傳染性胃腸炎病毒(TG EV)的生物學特征及其遺傳變異情況,從疑似感染TGEV的豬群中采集發(fā)病仔豬小腸,病料處理后在ST細胞上盲傳,至第5代出現(xiàn)特征性細胞病變,通過PCR和間接免疫熒光驗證,成功分離出2株TGEV,被命名為H E-1和HE-4。RT-PCR方法擴增測序其S基因,對14株TGEV S基因進化和變異情況進行分析。氨基酸比對發(fā)現(xiàn),與TGEV經(jīng)典毒株P(guān)urdue株相比,分離株在第562~564 aa處缺少N NT糖基化位點,與TS株相比在第375~377 aa處缺少ND T糖基化位點;同時,HE-4株在影響抗原位點D位點的第385 aa處發(fā)生突變。這種糖基化位點的缺失和抗原位點的突變,對TGEV生物學特性的影響有待進一步研究。
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學學院;撫順市畜牧局;東北農(nóng)業(yè)大學電氣與信息學院;
【關(guān)鍵詞】: 豬傳染性胃腸炎病毒 分離鑒定 S基因 分子生物學特征
【基金】:國家自然科學基金項目(31372438,31200122) 教育博士點基金項目(20122325110019) 哈爾濱市科技局“優(yōu)秀學科帶頭人”研究專項資金項目(2012RFXXN009)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 引物名稱Primer names引物序列(5′→3′)Primer sequences產(chǎn)物大小/kbProduct sizeS0-F GGCTTAGTAGTAATATTTTGCATAC200S0-R ATTATAGCAGATGATAGAATTAACAS1-F ATGAAAAAACTATTTGTGG2 826S1-R GGGACGGAAGTATGTATTTTS2-F CCCTTAAATTGGCATCTGTTG1 628S2-R TTAATGGACGTGCACTTTTTC表1
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,本文編號:913175
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