SRO9基因參與調(diào)控釀酒酵母內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)
發(fā)布時(shí)間:2017-09-22 19:24
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【摘要】:【目的】研究酵母SRO9基因在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)中的作用!痉椒ā坷肞CR介導(dǎo)的同源重組方法構(gòu)建SRO9基因缺失菌株,檢測(cè)其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑衣霉素處理?xiàng)l件下的克隆形成能力;通過(guò)比色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的H2O2含量,超氧化物歧化酶SOD活性和細(xì)胞增殖能力;通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激靶基因和超氧化物歧化酶編碼基因SOD1及SOD2的轉(zhuǎn)錄水平!窘Y(jié)果】相對(duì)于野生型酵母菌株,SRO9基因缺失酵母菌株對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑衣霉素的抗性增強(qiáng),參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的靶基因轉(zhuǎn)錄上調(diào);細(xì)胞內(nèi)H2O2含量下降,SOD1、SOD2轉(zhuǎn)錄水平降低,總SOD活性降低;對(duì)氧化劑CHP和VK3的抵抗性減弱,復(fù)制壽命明顯縮短。【結(jié)論】SRO9基因缺失酵母細(xì)胞對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑衣霉素的抗性增強(qiáng),原因可能是由于SRO9基因缺失激活了細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。
【作者單位】: 廣東醫(yī)科大學(xué)衰老研究所;廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: SRO 釀酒酵母 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激件
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31101051,81170327) 廣東省醫(yī)學(xué)科研究基金項(xiàng)目(No.B2014299) 東莞市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2012108102022) 廣東醫(yī)學(xué)院建博科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(No.STIF201102)~~
【分類(lèi)號(hào)】:Q933
【正文快照】: 機(jī)體細(xì)胞在受到外界因素刺激后會(huì)發(fā)生一系列應(yīng)激反應(yīng),例如氧化應(yīng)激反應(yīng)(Oxidative stress,OS)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)(Endoplasmic reticulum stress,ERS)。應(yīng)激反應(yīng)的進(jìn)行涉及到許多基因。因此,研究人員可以通過(guò)構(gòu)建基因缺失或突變細(xì)胞(或者個(gè)體),研究這些細(xì)胞對(duì)不同環(huán)境因素的應(yīng)激,
本文編號(hào):902620
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