本文關(guān)鍵詞：豬博卡病毒不同基因型三重PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用

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【摘要】：為鑒別豬博卡病毒1型、2型和3型3種基因型,根據(jù)豬博卡病毒基因序列分別設(shè)計3對針對保守區(qū)域的引物進行PCR擴增,擴增目的片段大小分別為645 bp(PBoV1型)、352 bp(PBoV2型)和259 bp(PBoV3型)。通過引物濃度和退火溫度等條件優(yōu)化,首次建立了同時檢測豬博卡病毒3種基因型的三重PCR方法。所建立的三重PCR方法擴增其他豬病病毒結(jié)果均為陰性,最低檢測限為8×10-7ng/μL。結(jié)果表明,該方法具有較好的特異性和敏感性。對臨床樣品進行三重PCR和單項PCR檢測,對比結(jié)果顯示符合率為100%。該方法的建立為豬博卡病毒3種不同基因型的鑒別檢測提供了有效手段。
【作者單位】： 北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所畜禽疫病防控技術(shù)北京市重點實驗室;北京農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 豬博卡病毒 基因型 三重PCR 檢測
【基金】：北京市農(nóng)林科學(xué)院科技創(chuàng)新能力建設(shè)專項(KJCX20140409) 北京市科技計劃項目(Z131100003113015)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 博卡病毒(Bocavirus)為細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒亞科、博卡病毒屬的成員。豬博卡病毒(Porcine bo-cavirus,PBo V)是2009年在患有仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征的豬淋巴結(jié)中,通過隨機置換擴增的方法和高通量測序技術(shù)在瑞典首次發(fā)現(xiàn)[1]。由于對PBo V的研究仍處于起步階段,其單獨的致

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林峰;;人博卡病毒感染的研究進展[J];病毒學(xué)報;2007年02期

2 傅希;伍嚴(yán)安;;博卡病毒的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年15期

3 陳倩;胡正;;人博卡病毒的研究進展[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2010年08期

4 李建寧;姚青;孫玉寧;;博卡病毒屬基因組特征與致病的分子機制[J];微生物學(xué)報;2013年05期

5 何濤君;王瓊;何英;黃烈;張銀輝;林廣裕;陸學(xué)東;;采用半巢式PCR技術(shù)從臨床標(biāo)本中克隆人類博卡病毒的全基因[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

6 黃頭華;;我國醫(yī)學(xué)界首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒[J];中國醫(yī)藥指南;2006年09期

7 何慧;劉新;;新發(fā)現(xiàn)的呼吸道感染病原——人博卡病毒[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年21期

8 錢淵;;人博卡病毒研究進展[J];中國實用兒科雜志;2009年01期

9 周建林;伍嚴(yán)安;;人博卡病毒的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2009年12期

10 鄒麗容;鄭夔;周杰;莫艷玲;方苓;陳秋霞;李暉;柯昌文;;熒光定量PCR方法快速檢測人博卡病毒的研究[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹虹;彭亮;;新型微小病毒——人類博卡病毒[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2009年

2 林峰;曾愛平;楊寧敏;林海燕;鄭昌華;李樺;陳弘;李旭陽;郁明素;金大智;王升啟;;小兒博卡病毒感染的臨床與實驗研究[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

3 林峰;曾愛平;林海燕;鄭昌華;李樺;陳弘;李旭陽;郁明素;楊寧敏;金大智;王升啟;;小兒博卡病毒感染的臨床與實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

4 陸學(xué)東;林廣裕;周仁彬;王瓊;林創(chuàng)興;楊來智;陸長東;;廣東地區(qū)首例人博卡病毒的檢出及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2008年

5 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢測及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會學(xué)術(shù)年會、兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 林峰;;人博卡病毒感染支氣管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征研究[A];2008年浙江省兒科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

7 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢出及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國兒科呼吸學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

8 李芳;孫玉寧;張茜;蘆曉紅;;博卡病毒MVC在不同種屬細(xì)胞系病毒基因組復(fù)制及感染特性分析[A];中國的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進步推動中國西部經(jīng)濟與社會發(fā)展——2011年中國遺傳學(xué)會大會論文摘要匯編[C];2011年

9 何彪;楊凡力;涂長春;;中國蝙蝠病毒宏基因組學(xué)研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

10 王維;林書祥;黃敬孚;徐曉華;;天津地區(qū)嬰幼兒腹瀉博卡病毒的檢出及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 記者　 鄧明 通訊員　 白培生 劉巧突;郴州在國內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒[N];湖南日報;2006年

2 記者 吳德群;口岸連查4宗 人感染博卡病毒[N];深圳特區(qū)報;2012年

3 陳茂j 趙斌;溫嶺市一院在我國首次發(fā)現(xiàn)人博卡病毒[N];中國醫(yī)藥報;2006年

4 記者 王理略 通訊員 任麗瓊;首次克隆出人博卡病毒全基因組[N];湖北日報;2014年

5 貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院 郝飛 湯德元;豬博卡病毒研究進展[N];河北科技報;2012年

6 記者　 龍軍;我國首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒HBoV[N];光明日報;2006年

7 洪衛(wèi) 張敏;迎接照耀醫(yī)學(xué)高峰的新曙光[N];浙江日報;2006年

8 何彪 沈基飛;我學(xué)者發(fā)現(xiàn)新型SARS樣冠狀病毒[N];健康報;2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 程衛(wèi)霞;博卡病毒流行病學(xué)、致病性及基因進化研究[D];蘭州大學(xué);2011年

2 趙慧;兒童腹瀉相關(guān)的人博卡病毒2型的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 鄧雪鋒;人類博卡病毒感染性克隆的構(gòu)建及體外感染模型的研究[D];華中師范大學(xué);2013年

4 李京京;人類博卡病毒HBoV1基因組克隆及轉(zhuǎn)錄、翻譯分子機制研究[D];華中師范大學(xué);2012年

5 李雪萌;博卡病毒感染的檢測和原始抗原效應(yīng)的相關(guān)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬均;兒童急性呼吸道感染人博卡病毒檢測及分析[D];吉林大學(xué);2009年

2 梁丹丹;小兒呼吸道人類博卡病毒感染免疫致病機制的初步研究[D];汕頭大學(xué);2011年

3 劉萌萌;屠宰豬博卡病毒全基因序列測定及檢測技術(shù)研究[D];天津大學(xué);2014年

4 楊晚竹;豬博卡病毒分子生物學(xué)特征及感染性克隆構(gòu)建的初步探索[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2012年

5 漆正宇;我國人博卡病毒的分子流行病學(xué)及衣殼蛋白獨有區(qū)表達純化的研究[D];貴州大學(xué);2007年

6 韓虎;人博卡病毒結(jié)構(gòu)蛋白與非結(jié)構(gòu)蛋白功能的初步研究[D];華中師范大學(xué);2012年

7 丁媛;重慶地區(qū)兒童呼吸道博卡病毒感染特點[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

8 李紅學(xué);人博卡病毒在健康獻漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

9 周瓊?cè)A;人博卡病毒在急性下呼吸道感染住院兒童中的現(xiàn)狀分析[D];湖南師范大學(xué);2011年

10 張宏彪;豬博卡病毒在我國部分地區(qū)的分子流行病學(xué)調(diào)查及其熒光定量PCR方法的建立與應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

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本文編號：890296