本文關(guān)鍵詞：利用同框敲除技術(shù)研究Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的代謝產(chǎn)物

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【摘要】：為了闡明Streptomyces sahachiroi ATCC 33158中Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的功能,利用同源雙交換的方法對該基因進(jìn)行同框敲除,采用異位表達(dá)的方法進(jìn)行了相應(yīng)的回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)。通過高效液相色譜及液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析發(fā)現(xiàn)基因orf18的敲除會明顯降低發(fā)酵產(chǎn)物中苯甲酸鹽的含量,回補(bǔ)該基因能夠在一定程度上恢復(fù)苯甲酸鹽的產(chǎn)量,表明orf18在原宿主中極有可能參與苯甲酸鹽的生物合成。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 鏈霉菌 Ⅲ型聚酮合酶 同源雙交換 同框敲除 基因回補(bǔ) 苯甲酸鹽
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31270136) 教育部留學(xué)回國人員科研啟動基金項(xiàng)目([2009]1590);教育部新世紀(jì)人才支持計(jì)劃項(xiàng)目(NCET-08-0779)
【分類號】：Q55
【正文快照】： 鏈霉菌是一種產(chǎn)自土壤的革蘭氏陽性細(xì)菌,可產(chǎn)生大量具有生物活性的代謝產(chǎn)物,包括抗生素、抗腫瘤制劑以及免疫抑制劑等[1]。隨著研究的不斷深入,越來越多活性代謝產(chǎn)物的生物合成基因被克隆及分析。根據(jù)對應(yīng)的生物合成酶的特性,可以將這些作用效果多樣、結(jié)構(gòu)紛繁復(fù)雜的化合物分，

本文編號：827692