本文關(guān)鍵詞：三疣梭子蟹nm23基因克隆及在卵巢發(fā)育中的表達(dá)分析

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【摘要】：Nm23基因編碼的核苷二磷酸激酶(NDPK)參與調(diào)控生物體的多項(xiàng)生理功能,包括生長、發(fā)育、分化和腫瘤轉(zhuǎn)移等。根據(jù)三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中的nm23同源序列,利用c DNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)首次克隆獲得了三疣梭子蟹nm23基因的全長c DNA序列(Gen Bank登錄號(hào):KP027331)。該序列全長777 bp,編碼一個(gè)151個(gè)氨基酸的蛋白,該蛋白包含一個(gè)典型的核苷二磷酸激酶(NDPK)區(qū)域,具有NDPK活性位點(diǎn)和多肽結(jié)合位點(diǎn)。推導(dǎo)的氨基酸序列與已知甲殼動(dòng)物的nm23一致性達(dá)到90%以上,與脊椎動(dòng)物第一類nm23的一致性也達(dá)到70%以上。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn)第一類nm23與第二類nm23分別聚為一支,甲殼動(dòng)物nm23屬于第一類,且與nm23-1和nm23-2親緣關(guān)系較近。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)技術(shù)分析了三疣梭子蟹nm23的組織差異表達(dá)及其在卵巢發(fā)育過程中的表達(dá)水平變化,結(jié)果表明nm23在三疣梭子蟹各組織內(nèi)均有表達(dá),其表達(dá)水平在眼柄、肌肉和Y器中最高,卵巢和肝胰腺次之。在三疣梭子蟹卵巢發(fā)育過程中,卵巢中nm23的表達(dá)水平在Ⅰ期最高,之后隨著卵巢發(fā)育的進(jìn)行,其表達(dá)水平逐漸下降,并在成熟期降至最低,這表明nm23可能參與調(diào)控三疣梭子蟹的卵巢發(fā)育。
【作者單位】： 寧波大學(xué)海洋學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 三疣梭子蟹 nm 基因克隆 卵巢發(fā)育 基因表達(dá)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(41376152,40976098) 浙江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(LY13C190006)
【分類號(hào)】：S917.4
【正文快照】： Nm23基因編碼的核苷二磷酸激酶(nucleosidediphosphate kinase,NDPK,EC 2.7.4.6)可以催化核苷三磷酸發(fā)生磷基轉(zhuǎn)移從而生成相應(yīng)的核苷二磷酸(NDP)[1]。研究表明,NDPK不僅可以作為看家基因維持生物體內(nèi)核苷酸平衡,還參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞信息傳遞等多種生

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