本文關(guān)鍵詞：日本囊對蝦Na-K-2Cl共同轉(zhuǎn)運蛋白基因的克隆與組織表達(dá)分析

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【摘要】：利用反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)等技術(shù)在鰓組織中獲得日本囊對蝦(Marsupenaeus japonicus)Na-K-2Cl共同轉(zhuǎn)運蛋白(NKCC)cDNA全序列,包含14bp的5′非編碼區(qū)(5′-UTR)、201bp的3′-UTR和3 183bp的開放閱讀框(ORF).該ORF共編碼1 060個氨基酸,預(yù)測蛋白分子質(zhì)量為117.051ku,理論等電點為6.57,命名為Mj-NKCC.預(yù)測Mj-NKCC二級結(jié)構(gòu)由10個跨膜區(qū)組成,跨膜區(qū)的氨基酸序列和布局均相對保守.同源對比結(jié)果顯示,Mj-NKCC的氨基酸序列與夏威夷海蝕洞蝦(Halocaridina rubra)的Na-K-2Cl共同轉(zhuǎn)運蛋白相似度最高,為77%.系統(tǒng)進(jìn)化分析表明Mj-NKCC與夏威夷海蝕洞蝦、藍(lán)蟹(Callinectes sapidus)等甲殼動物的NKCC聚為一支.實時熒光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,Mj-NKCC基因在肝胰腺、鰓、胃、腸、心、眼柄、肌肉和血細(xì)胞中均有表達(dá),鰓組織中表達(dá)量最高;在鹽度驟變時,該基因表達(dá)變化顯著,表明其很可能參與了對蝦的滲透壓調(diào)節(jié),在對蝦的滲透平衡中發(fā)揮重要作用.
【作者單位】： 廈門大學(xué)海洋與地球?qū)W院;
【關(guān)鍵詞】： 日本囊對蝦 Na-K-Cl共同轉(zhuǎn)運蛋白(NKCC) 基因克隆 組織表達(dá) 鹽度驟變
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(2012AA10A409) 國家星火計劃(2015GA720002) 國家蝦產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系崗位專家項目(CARS-47) 福建省科技廳區(qū)域重大項目(2013N3004) 廈門市南方海洋中心項目(14CZY033HJ07)
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 日本囊對蝦(Marsupenaeus japonicus)屬甲殼綱(Crustacea),十足目(Decapoda),對蝦科(Penaeidae),囊對蝦屬(Marsupenaeus),在我國黃海、東海和南海海域均有分布,是我國重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖蝦類[1].日本囊對蝦屬海水廣鹽性對蝦,適宜的鹽度范圍是15~34,但對水體鹽度的變化較為敏感.陳

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1 劉錦q，

本文編號：823188