本文關(guān)鍵詞：重組蛋白sCAR-TMTP1增強腺病毒對骨肉瘤細胞基因轉(zhuǎn)染效率的研究

  更多相關(guān)文章： 骨肉瘤 腺病毒 TMTP肽 柯薩奇腺病毒受體 重組蛋白 基因治療 腫瘤細胞

【摘要】：目的提高腺病毒(adenovirus,ADV)在缺乏柯薩奇腺病毒受體(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的骨肉瘤細胞中的轉(zhuǎn)染效率。方法通過昆蟲(Bac-to-Bac)桿狀病毒表達系統(tǒng)表達含有CAR胞外段(s CAR)及TMTP1肽的重組蛋白(s CAR-TMTP1),并對其純化、鑒定。流式細胞儀分別檢測骨肉瘤細胞及人胚腎細胞293(HEK293)的CAR表達水平,ADV對其的感染效率及FITC-TMTP1的結(jié)合能力。重組蛋白s CAR-TMTP1與ADV共同孵育形成復(fù)合物,流式細胞儀研究其在缺乏CAR的骨肉瘤細胞(MG-63)中的轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表達及純化的s CAR-TMTP1蛋白在相對分子質(zhì)量約31 000處可見特異蛋白條帶,感染的sf9細胞裂解上清可與兔抗小鼠s CAR單克隆抗體發(fā)生特異性反應(yīng)。MG-63可與FITCTMTP1特異結(jié)合,其CAR表達水平低,ADV轉(zhuǎn)染效率低。經(jīng)s CAR-TMTP1修飾后的ADV/GFP對MG-63細胞的感染效率顯著高于未經(jīng)修飾的含報告基因GFP的ADV(ADV/GFP)。結(jié)論重組蛋白s CAR-TMTP1可顯著提升ADV對缺乏CAR的骨肉瘤細胞的轉(zhuǎn)染效率。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院婦產(chǎn)科;華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 骨肉瘤 腺病毒 TMTP肽 柯薩奇腺病毒受體 重組蛋白 基因治療 腫瘤細胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81202061)
【分類號】：R738
【正文快照】： 骨肉瘤(osteosarcoma)是最常見的原發(fā)惡性骨腫瘤,好發(fā)于青少年,其極易出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,且血行轉(zhuǎn)移發(fā)生早,其中最常見的是肺轉(zhuǎn)移。對于發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者,常規(guī)進行手術(shù)治療及化療,但臨床療效不佳,愈后不良,亟需探索發(fā)現(xiàn)新的治療模式[1]�；蛑委熓且环N有前景的新型治療策略,腺病毒

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9 朱U，

本文編號：821979