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絲瓜18S rRNA基因克隆及其作為內(nèi)參基因的應(yīng)用

發(fā)布時間:2017-09-05 15:31

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【摘要】:選擇合適的內(nèi)參基因是提高實(shí)時熒光定量PCR分析(q RT-PCR)準(zhǔn)確性的重要條件。18S r RNA基因表達(dá)范圍廣、表達(dá)量恒定,常作為內(nèi)參基因應(yīng)用于實(shí)時熒光定量PCR中。為了獲得絲瓜18S r RNA基因,并設(shè)計(jì)合適的熒光定量PCR內(nèi)參引物,解決絲瓜實(shí)時熒光定量PCR檢測中無內(nèi)參基因的現(xiàn)狀,通過PCR和序列測定,首次克隆到了絲瓜的18S r RNA基因序列,其長度為1 862 bp,Gen Bank登錄號為KM656452。在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)1對熒光定量PCR引物,該引物特異性強(qiáng),擴(kuò)增效率高,在絲瓜各生長發(fā)育階段及各種非生物脅迫條件下均能穩(wěn)定表達(dá),適合在絲瓜基因表達(dá)研究中作為內(nèi)參基因。該研究結(jié)果可為開展絲瓜重要功能基因的表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所;福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究中心;福建省蔬菜工程技術(shù)研究中心;福建省種植業(yè)技術(shù)推廣總站;
【關(guān)鍵詞】絲瓜 S rRNA 內(nèi)參基因 實(shí)時熒光定量PCR
【基金】:福建省屬公益類科研院所基本科研專項(xiàng)(2014R1026-11) 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院瓜類育種科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(STIT-I-0304)
【分類號】:S642.4
【正文快照】: 隨著基因組學(xué)和生物信息學(xué)的發(fā)展,基因表達(dá)分析已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)眾多研究領(lǐng)域,對發(fā)現(xiàn)和預(yù)測新基因及其功能、了解基因調(diào)控的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)等有重要作用[1-2]。實(shí)時熒光定量PCR(q RT-PCR)是一種在普通PCR定性技術(shù)上發(fā)展而來的新型核酸定量技術(shù),具有識別特異性強(qiáng)、速度快、反應(yīng)靈

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 黃河;牛雅靜;楊可;戴思蘭;;甘菊內(nèi)參基因ClTUA的克隆與表達(dá)分析[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年02期

2 羅少波;羅劍寧;鄭曉明;;我國絲瓜育種研究進(jìn)展與展望[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2006年01期

3 畢燕會;鄒丹燕;周志剛;;海帶配子體18S rRNA基因的克隆、序列分析及其作為內(nèi)參基因的應(yīng)用[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2009年01期

4 田佶;沈紅香;張杰;姚允聰;宋婷婷;耿慧;;蘋果屬觀賞海棠McANS基因克隆與不同葉色品種間表達(dá)差異分析[J];園藝學(xué)報(bào);2010年06期

5 沈江鋒;李俊敏;孫麗英;陳劍平;;水稻黑條矮縮病毒和水稻條紋葉枯病毒侵染下水稻qRT-PCR內(nèi)參基因的篩選[J];植物病理學(xué)報(bào);2014年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉文超;王東浩;王U喼,

本文編號:798793


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