發(fā)布時間：2017-09-05 12:33

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因拷貝數(shù)的實時熒光定量PCR檢測

  更多相關(guān)文章： 柑橘 實時熒光定量PCR 轉(zhuǎn)基因 拷貝數(shù) Southern blot

【摘要】：為分析轉(zhuǎn)基因柑橘中外源基因整合拷貝數(shù),基于實時熒光定量PCR法,建立通用、準確、簡便的轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因拷貝數(shù)檢測體系,利用該體系成功檢測了150個轉(zhuǎn)基因柑橘單株系外源基因整合拷貝數(shù)。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因柑橘中外源基因整合最低拷貝數(shù)為1,最高達5個,其中1、2和≥3拷貝的單株數(shù)分別占總數(shù)的40.0%、18.0%和42.0%;采用Southern blot技術(shù)進行檢測,結(jié)果基本一致,極少數(shù)單株經(jīng)實時熒光定量PCR分析的拷貝數(shù)比Southern blot檢測的數(shù)值高。說明本研究建立的實時熒光定量PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因整合拷貝數(shù)更加準確可靠�？截悢�(shù)為1~2的轉(zhuǎn)基因株系可作為將來開展轉(zhuǎn)基因目標性狀研究及轉(zhuǎn)基因生物安全性評價有利用價值的試驗材料。
【作者單位】： 西南大學/中國農(nóng)業(yè)科學院柑桔研究所 國家柑桔工程技術(shù)研究中心 國家柑桔品種改良中心;
【關(guān)鍵詞】： 柑橘 實時熒光定量PCR 轉(zhuǎn)基因 拷貝數(shù) Southern blot
【基金】：國家自然科學基金項目(31272150) 國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金項目(CARS-27) 國家科技支撐計劃項目(2012BAD19B06) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計劃項目(cstc2015jcyj A80042) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項(XDJK2014C129);中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項(XDJK2014A018) 重慶市集成示范重點項目(cstc2015jcsf-kjfp80027)
【分類號】：S666
【正文快照】： 隨著規(guī)�；�、實用化轉(zhuǎn)基因柑橘技術(shù)的發(fā)展,陸續(xù)得到了大量各類柑橘的轉(zhuǎn)基因材料。外源功能基因在基因組中的整合分析是轉(zhuǎn)基因柑橘材料進行生物安全性評價中必不可少的研究內(nèi)容。研究表明,多拷貝外源基因,多數(shù)轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)錄后沉默,而單拷貝外源基因很少發(fā)生沉默(Tang et al.,2007;

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1 胡加誼;羅志文;范鴻雁;李向宏;劉志昕;何凡;;菠蘿凋萎相關(guān)病毒 2實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J];園藝學報;2014年06期

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4 張金平;何曉明;江彪;謝大森;彭慶務(wù);王永飛;馬三梅;;鐮刀菌酸脅迫下節(jié)瓜實時熒光定量PCR分析內(nèi)參基因的選擇[J];廣東農(nóng)業(yè)科學;2014年10期

5 ;[J];;年期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 胡加誼;三種菠蘿凋萎相關(guān)病毒實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[D];海南大學;2014年

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本文編號：798003