本文關(guān)鍵詞：野生蕉β-1,3葡聚糖酶基因克隆及抗寒相關(guān)功能分析

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【摘要】：芭蕉屬(Musa)植物,是熱帶亞熱帶植物,常作為重要觀葉植物廣泛應(yīng)用于園林綠化及景觀布置。但是由于芭蕉屬植物多數(shù)容易受低溫傷害,極大限制了其種植區(qū)域,并且低溫易造成芭蕉葉片干枯黃化、水漬化,大大降低其觀賞性。因此提高芭蕉的抗寒能力,能夠豐富其在園林景觀上的應(yīng)用并提高觀賞價(jià)值。本試驗(yàn)確定了10種芭蕉屬植物資源的低溫半致死溫度,并測(cè)定了三明野生蕉的耐受低溫及β-1,3葡聚糖酶活性變化;基于香蕉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)β-1,3葡聚糖酶基因(GSP)家族進(jìn)行功能及進(jìn)化分析；克隆獲得與抗寒相關(guān)的三明野生蕉Mugsps,并分析Mugsps的亞細(xì)胞定位和實(shí)時(shí)熒光定量表達(dá)情況。主要研究如下：1芭蕉屬植物低溫下的生理生化研究1.1低溫下芭蕉屬植物的電解質(zhì)滲出率為比較芭蕉屬植物間的抗寒性差異,本試驗(yàn)選取10種福建省芭蕉屬植物種質(zhì),采用相對(duì)電導(dǎo)率法,測(cè)定低溫下植株葉片的電解質(zhì)滲出率,計(jì)算半致死溫度,并以抗寒性最強(qiáng)的三明野生蕉為材料,測(cè)定其能夠耐受的最低溫度。①以10種芭蕉屬植物的葉片為材料,設(shè)置處理溫度為28℃、1℃、0℃、-1℃、-2℃、-3℃、-4℃,處理時(shí)間為36 h。使用Logistic方程計(jì)算低溫半致死溫度(LT5o)。結(jié)果顯示10種芭蕉屬植物種質(zhì)電解質(zhì)滲出率呈現(xiàn)“S”型變化,計(jì)算出的半致死溫度由高到低為：血蕉(-0.377℃)、北蕉(-0.477℃)、天寶蕉(-0.739℃)、福州野生蕉(-1.086℃)、本地粉蕉(-1.187℃)、柴蕉(-1.204℃)、孟加拉蕉(.1.307℃)、三疊井蕉(-1.389℃)、澳洲粉蕉(-1.559℃)、三明野生蕉(-1.776℃),抗寒總體趨勢(shì)為野生蕉高于栽培蕉,試驗(yàn)的結(jié)果為不同氣候地區(qū)選擇適宜種植的觀賞芭蕉植物提供參考。②以三明野生蕉植株葉片為材料,測(cè)定其在0℃低溫下處理Oh、1 h、4h、8h、12h、 24 h、5d、10d、15 d的電解質(zhì)滲出率。結(jié)果顯示,隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng),三明野生蕉葉片電解質(zhì)滲出率呈現(xiàn)波浪型上升的趨勢(shì),在處理4h及24 h時(shí)電解質(zhì)滲出率降低,分別為23.68%(低于對(duì)照24.81%)及25.34%,說(shuō)明三明野生蕉在0℃處理下經(jīng)歷了兩次抗寒響應(yīng)過(guò)程,在處理4h時(shí)三明野生蕉啟動(dòng)了第一次抗寒響應(yīng),即時(shí)保護(hù)了細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),阻止胞內(nèi)物質(zhì)外滲,使得電解質(zhì)滲出率低于對(duì)照,隨著處理時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞組織不斷受到低溫破壞,在處理24 h時(shí)再次響應(yīng)低溫脅迫,通過(guò)產(chǎn)生抗寒相關(guān)功能蛋白、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及膜脂保護(hù)酶等調(diào)節(jié)低溫下的細(xì)胞生理狀態(tài),使得處理5d后葉片電解質(zhì)滲出率穩(wěn)定在27%左右,說(shuō)明三明野生蕉經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的低溫適應(yīng),已經(jīng)能夠耐受0℃脅迫。1.2低溫下三明野生蕉β-1,3葡聚糖酶活性變化采摘三明野生蕉植株新葉于13℃、8℃、4℃、0℃、-2℃、-4℃、-6℃下處理36h,提取粗酶液,以昆布多糖為反應(yīng)底物,采用DNS法測(cè)定還原糖生成量。結(jié)果表明,在13℃芭蕉屬植物的低溫臨界生長(zhǎng)溫度下,β-1,3葡聚糖酶活性升高為對(duì)照的1.2倍,隨著處理溫度的降低,β-1,3葡聚糖酶活性呈現(xiàn)“先降低后升高再降低”的表現(xiàn)趨勢(shì),在三明野生蕉半致死溫度附近(-2℃)達(dá)到酶活性高峰,為對(duì)照的1.4倍。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,低溫能夠刺激β-1,3葡聚糖酶在植物響應(yīng)低溫脅迫的幾個(gè)關(guān)鍵溫度提高酶活性,是植物的低溫保護(hù)酶。2基于香蕉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)的GSP全基因家族功能與進(jìn)化分析植物β-1,3葡聚糖酶(EC.3.2.1.39)屬于糖基水解酶酶第17家族,家族成員數(shù)量眾多,功能復(fù)雜。本試驗(yàn)利用隱馬爾科夫模型根據(jù)GSP特征結(jié)構(gòu)域(Pfam:PF00332)重新搜索本地香蕉基因組(尖葉蕉與長(zhǎng)梗蕉)數(shù)據(jù)庫(kù),獲得65條尖葉蕉(M.acuminata)GSPs,剔除尖葉蕉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中不含有GSP特征結(jié)構(gòu)域的序列30條,增加未注釋的GSP序列2條；獲得69條長(zhǎng)梗蕉(M.balbisiana)GSPs,剔除長(zhǎng)梗蕉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中不含有GSP特征結(jié)構(gòu)域序列23條,增加未注釋的GSP序列9條。構(gòu)建尖葉蕉與擬南芥GSP家族基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)發(fā)現(xiàn),尖葉蕉GSP基因家族可分為α(α1、α2、α3)、β(β1、β2、β3)、γ三大類,α與γ類主要參與植物生長(zhǎng)發(fā)育,p類具有PR功能。長(zhǎng)梗蕉與尖葉蕉的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)表明,除了長(zhǎng)梗蕉“ITC1587 Bchr2 P03966"基因與其他GSP成員的相似性較低獨(dú)自歸為一類6以外,其余基因均能找到直系同源序列或是相似性很高,說(shuō)明GSP家族基因功能在兩個(gè)亞種中保存較完整。對(duì)尖葉蕉GSP家族基因的染色體定位分析表明GSP分布于2-11號(hào)染色體,不具有串聯(lián)重復(fù)序列。研究表明芭蕉科植物經(jīng)歷了三次自身全家族基因復(fù)制事件,計(jì)算尖葉蕉20對(duì)GSPs旁系同源基因?qū)a/Ks值均小于1,推測(cè)GSP家族基因在基因組復(fù)制事件后的凈化選擇起著主要作用。3野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps的克隆分析以三明野生蕉組培苗為材料,利用RT-PCR和RACE技術(shù),以合成的經(jīng)13℃處理36 h的葉片cDNA為模板,采用同源克隆法獲得5條β-1,3葡聚糖酶的cDNA及DNA序列,分別命名為Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp3、Mugsp4、Mugsp5。序列分析表明：Mugsp1.2、Mugsp2、 Mugsp3、Mugsp4和Mugsp5均屬于β1類p-1,3葡聚糖酶基因,cDNA的ORF長(zhǎng)度分別為1020、1047、999、1023和960 bp,分別編碼339、348、332、340和319個(gè)氨基酸。Mugsp1.2. Mugsp2、Mugsp4均含有1個(gè)內(nèi)含子,而Mugsp3、MHgsp5不具有內(nèi)含子結(jié)構(gòu),這與尖葉蕉和長(zhǎng)梗蕉基因組上的同源基因結(jié)構(gòu)差異較大,將Mugsp1.2同前人克隆獲得的Mugsp(915 bp)和Mugsp1(951 bp)序列比較發(fā)現(xiàn)Mugsp1.2、Mugsp、Mugsp1是來(lái)自于同一基因的不同轉(zhuǎn)錄本,但是只有Mugsp1.2符合GT-AG內(nèi)含子剪切規(guī)則,為該基因的正常轉(zhuǎn)錄本,而Augsp、 Mugsp1則是外顯子缺失型的可變剪接體。生物信息學(xué)預(yù)測(cè)表明：除了Mugsp5以外,Mugsp1.2、 Mugsp2、Mugsp3、Mugsp4均具有N端信號(hào)肽。Mugsp1.2、Mugsp4編碼堿性β-1,3葡聚糖酶,含有一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域；Mugsp2、Mugsp3、Mugsp5編碼酸性β-1,3葡聚糖酶,不具有跨膜結(jié)構(gòu)域；5條Mugsps均含有MAPK等多個(gè)磷酸化位點(diǎn),不含有X8、GPI錨定結(jié)構(gòu)域、CTPP結(jié)構(gòu)域及核定位信號(hào)。因此推測(cè)Mugsp1.2、Mugsp4屬于Ⅱ型跨膜蛋白,而Mugsp2、Mugsp3、 Mugsp5屬于膜周邊蛋白,Mugsps(Mugspl.2-Mugsp5)可能屬于一類新的PR相關(guān)p-1,3葡聚糖酶基因,并參與了MAPK抗寒調(diào)控途徑。4野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps的亞細(xì)胞定位分析為探究Mugsps在低溫下的作用機(jī)制,本試驗(yàn)對(duì)克隆獲得的其中3個(gè)β-1,3葡聚糖酶基因(Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4)進(jìn)行了常溫及低溫下的亞細(xì)胞定位觀察。將Mugspl.2、Mugsp2、 Mugsp4的完整ORF序列同PCAMBIA1302-GFP構(gòu)建融合蛋白表達(dá)載體,獲得35S-Mugsp1.2-GFP、35S-Mugsp2-GFP、35S-Mugsp4-GFP重組質(zhì)粒,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染洋蔥表皮細(xì)胞,將侵染的洋蔥表皮材料,一部分置于常溫培養(yǎng)后使用共聚焦成像儀觀察亞細(xì)胞定位,另一部分轉(zhuǎn)移到8℃低溫下繼續(xù)培養(yǎng)后,使用1 μg/mLDAPI染色后再進(jìn)行亞細(xì)胞定位觀察。觀察結(jié)果表明：常溫下Mugsp1.2-GFP、Mugsp2-GFP、Mugsp4-GFP蛋白主要分布在細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)上,GFP空載體蛋白在細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞間隙處均有分布,8℃低溫處理后Mugsp1.2-GFP、Mugsp2-GFP、Mugsp4-GPF融合表達(dá)載體的綠色熒光信號(hào)除了分布在液泡膜、細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)外,還分布在細(xì)胞核。推測(cè)低溫下膜蛋白Mugspl.2、 Mugsp2、Mugsp4感受低溫信號(hào)后,通過(guò)結(jié)合某些鈣調(diào)蛋白或者通過(guò)磷酸化作用,將抗寒信號(hào)傳遞至細(xì)胞核,調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子及下游功能基因的表達(dá)。5野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps低溫處理下的熒光定量表達(dá)分析為進(jìn)一步研究Mugsps在低溫下的抗寒機(jī)理,本試驗(yàn)以三明野生蕉組培苗為材料,以18s為內(nèi)參基因,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)Mugsp1、Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp3、 Mugsp4、Mugsp5 7個(gè)基因在低溫下的表達(dá)情況。試驗(yàn)結(jié)果表明：①在28℃、20℃、13℃、4℃、0℃、-2℃、-4℃、-6℃不同溫度處理36h下：隨著處理溫度的降低,Mugsps均能響應(yīng)低溫脅迫改變表達(dá)量,但是成員間的表達(dá)水平存在差異：Mugsp2表現(xiàn)為“先升高后降低”的趨勢(shì),只有一個(gè)表達(dá)高峰,在4℃時(shí)表達(dá)量最高,為常溫對(duì)照的3.5倍,其余基因(Mugsp、Mugsp1、Mugsp1.2、Mugsp3、Mugsp4、Mugsp5)則呈現(xiàn)“M”型的表達(dá)趨勢(shì),有兩個(gè)表達(dá)高峰,其中Mugsp、Mugspl.2、Mugsp5分別在13℃及4℃時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰,表達(dá)量為常溫的1.7、2.1、0.8及2.5、2.2、1.4倍左右,而Mugsp1、 Mugsp3、Mugsp4在13℃及0℃表達(dá)量達(dá)到最高,分別為常溫的2.0、0.8、0.6及2.7、5.0、4.5倍左右。總體上,Mugsp1、Mugsp1.2、Mugsp3對(duì)溫度變化響應(yīng)劇烈,表達(dá)量較高,推測(cè)起著更關(guān)鍵的抗寒作用。定量結(jié)果與不同溫度下β-1,3葡聚糖酶活性的表現(xiàn)趨勢(shì)基本一致,說(shuō)明低溫下Augsps能夠協(xié)同翻譯成β-1,3葡聚糖酶協(xié)助植株抵抗低溫脅迫。②常溫28℃、8℃及8℃低溫下噴施0.5 mmol/L SA分別進(jìn)行1h、4h、8h、12h、 24 h處理后：8℃低溫下,Mugsps均能相繼在1-4h內(nèi)提高表達(dá)量,其中Mugsp、Mugsp1、 Mugsp1.2在低溫處理1h時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰,而Mugsp2、Mugsp4、Mugsp5在處理4h時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰,說(shuō)明Mugsps能夠快速響應(yīng)低溫脅迫,；8℃噴施SA處理則會(huì)推遲Mugsps的表達(dá),使得Mugsp、Mugsp1、Mugsp1.2在處理12h時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰,而此時(shí)Mugsp2、Mugsp4、 Mugsp5表達(dá)量才開(kāi)始升高,并在24 h表達(dá)量顯著提高,推測(cè)低溫下Mugsps可能參與了抗寒傳導(dǎo)途徑早期的上游調(diào)控,而低溫SA處理延緩了細(xì)胞膜受到的低溫傷害,使得Mugsps因未能感受到膜變化而推遲表達(dá)。綜上所述,三明野生蕉β-1,3葡聚糖酶基因Mugsps在8℃低溫刺激下,可能通過(guò)與MAPK的磷酸化作用作為抗寒途徑的上游信號(hào)傳導(dǎo)因子,在1-4 h短時(shí)間內(nèi)迅速提高基因表達(dá)量,將抗寒信號(hào)快速?gòu)募?xì)胞膜傳遞至細(xì)胞核,起著抗寒傳導(dǎo)途徑中的早期調(diào)控作用,協(xié)助激活下游基因表達(dá)。試驗(yàn)結(jié)果為探究β-1,3葡聚糖酶極其基因在芭蕉屬植物中的抗寒功能及作用機(jī)制,為提高芭蕉植物的抗寒性,研究植物的抗寒機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：野生蕉 β-1 3葡聚糖酶 抗寒性 全基因家族分析 亞細(xì)胞定位 熒光定量表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S682.36
【目錄】：

• 縮寫(xiě)詞8-9
• 摘要9-13
• Abstract13-18
• 第一章 引言18-25
• 1 植物抗寒研究進(jìn)展18-20
• 1.1 植物低溫為害生理18-19
• 1.2 植物抗寒指標(biāo)19
• 1.3 植物冷傳導(dǎo)途徑19-20
• 2 芭蕉屬植物抗寒相關(guān)研究20-21
• 2.1 芭蕉屬植物的低溫為害生理20-21
• 2.2 芭蕉屬植物低溫傷害發(fā)生規(guī)律21
• 2.3 芭蕉屬植物抗寒相關(guān)基因的研究21
• 3 植物β-1,3葡聚糖酶的研究進(jìn)展21-23
• 3.1 β-1,3葡聚糖酶的功能21-22
• 3.2 β-1,3葡聚糖酶的分類22-23
• 4 本研究的意義及主要內(nèi)容23-25
• 4.1 本研究的意義23-24
• 4.2 研究的主要內(nèi)容24-25
• 第二章 芭蕉屬植物低溫下的生理生化研究25-37
• 第一節(jié) 低溫下芭蕉屬植物的電解質(zhì)滲出率測(cè)定25-31
• 1 材料與方法25-26
• 1.1 材料25-26
• 1.2 方法26
• 1.2.1 低溫預(yù)處理26
• 1.2.2 處理?xiàng)l件26
• 1.2.3 電導(dǎo)率測(cè)定26
• 1.2.4 半致死溫度計(jì)算26
• 2 結(jié)果與分析26-29
• 2.1 低溫脅迫下10種芭蕉屬植物的相對(duì)電導(dǎo)率(REC)變化26-27
• 2.2 低溫脅迫下10種芭蕉屬植物的半致死溫度(LT_(50))確定27-28
• 2.3 三明野生蕉的耐受低溫確定28-29
• 3. 討論29-31
• 3.1 芭蕉屬植物的抗寒差異分析29-30
• 3.2 植物能夠啟動(dòng)多次抗寒響應(yīng)30
• 3.3 10種芭蕉屬植物適宜種植的區(qū)域探討30-31
• 第二節(jié) 低溫下三明野生蕉β-1,3葡聚糖酶活性變化31-37
• 1 材料與方法31-32
• 1.1 材料31
• 1.2 方法31-32
• 1.2.1 材料處理31
• 1.2.2 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作31-32
• 1.2.3 粗酶液提取32
• 1.2.4 待測(cè)樣品制備32
• 1.2.5 DNS法測(cè)定還原糖生成量32
• 2 結(jié)果與分析32-35
• 2.1 不同溫度處理下三明野生蕉葉片表面變化32-33
• 2.2 不同溫度處理下β-1,3葡聚糖酶活性變化33-35
• 3 討論35-37
• 3.1 β-1,3葡聚糖酶在內(nèi)的PR蛋白具有重要的抗寒功能35
• 3.2 β-1,3葡聚糖酶可能參與了植物的抗寒及抗凍響應(yīng)35-37
• 第三章 基于香蕉基因組數(shù)據(jù)庫(kù)的GSP全基因家族功能與進(jìn)化分析37-53
• 1 材料與方法37-38
• 1.1 GSP家族基因成員獲得與驗(yàn)證37
• 1.2 GSP系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建及基因結(jié)構(gòu)分析37-38
• 1.3 GSP家族基因在染色體上的定位與基因復(fù)制事件推測(cè)38
• 2 結(jié)果與分析38-51
• 2.1 尖葉蕉與長(zhǎng)梗蕉GSP家族基因序列的獲得38-40
• 2.2 尖葉蕉GSP家族基因分類及功能分析40-41
• 2.3 尖葉蕉與長(zhǎng)梗蕉GSP基因家族比較與進(jìn)化分析41-48
• 2.4 尖葉蕉GSP家族基因的染色體定位與進(jìn)化分析48-51
• 3 討論51-53
• 3.1 GSP功能具有多樣性和保守性51
• 3.2 GSP抗寒及PR相關(guān)功能可能來(lái)源于外源基因的插入51-53
• 第四章 野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps的克隆分析53-63
• 1 材料與方法53-55
• 1.1 材料53
• 1.2 方法53-55
• 1.2.1 三明野生蕉總RNA提取及cDNA合成53
• 1.2.2 三明野生蕉DNA提取53-54
• 1.2.3 Mugsps的cDNA和DNA克隆及分析54-55
• 2 結(jié)果與分析55-60
• 2.1 三明野生蕉Mugsps的cDNA和DNA序列獲得55-56
• 2.2 三明野生蕉、尖葉蕉及長(zhǎng)梗蕉的β-1,3葡聚糖酶基因序列比對(duì)分析56-58
• 2.3 三明野生蕉Mugsps的生物信息學(xué)分析58-60
• 3 討論60-63
• 3.1 Mugsps可變剪接參與植物抗寒60-61
• 3.2 Mugsps可能參與抗寒相關(guān)蛋白激酶MAPK調(diào)控途徑61
• 3.3 Mugsps可能屬于一類新的PR相關(guān)β-1,3葡聚糖酶基因61-63
• 第五章 野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps的亞細(xì)胞定位分析63-69
• 1 材料與方法63-64
• 1.1 材料63
• 1.2 方法63-64
• 1.2.1 三明野生蕉總RNA的提取及cDNA合成63
• 1.2.2 引物設(shè)計(jì)與PCR擴(kuò)增63-64
• 1.2.3 融合表達(dá)載體構(gòu)建64
• 1.2.4 表達(dá)載體轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞及顯微觀察64
• 2 結(jié)果與分析64-67
• 2.1 常溫下Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4的亞細(xì)胞定位64-66
• 2.2 低溫誘導(dǎo)Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4定位改變66-67
• 3 討論67-69
• 3.1 β-1,3葡聚糖酶的膜定位是行使多種功能的基礎(chǔ)67
• 3.2 低溫下Mugsps可能參與植物抗寒途徑的上游調(diào)控67-69
• 第六章 野生蕉抗寒相關(guān)Mugsps的實(shí)時(shí)熒光定量表達(dá)分析69-76
• 1 材料與方法69-70
• 1.1 材料69
• 1.2 方法69-70
• 1.2.1 三明野生蕉材料處理及總RNA提取、cDNA合成69
• 1.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)69-70
• 1.2.3 熒光定量PCR擴(kuò)增70
• 2 結(jié)果與分析70-74
• 2.1 不同溫度處理下的三明野生蕉葉片形態(tài)變化70-71
• 2.2 不同低溫處理下Mugsps表達(dá)分析71-72
• 2.3 低溫及SA處理后Mugsps表達(dá)分析72-74
• 3 討論74-76
• 3.1 Mugsps協(xié)同抵御植物低溫脅迫74
• 3.2 低溫下SA可能通過(guò)保護(hù)細(xì)胞膜推遲對(duì)Mugsps的誘導(dǎo)74-75
• 3.3 Mugsps可能作為植物抗寒途徑的早期信號(hào)傳導(dǎo)因子75-76
• 第七章 結(jié)論76-80
• 參考文獻(xiàn)80-88
• 附錄88-97
• 圖版Ⅰ 三明野生蕉Mugsps的序列信息88-92
• 圖版Ⅱ 三明野生蕉Mugsps生物信息學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)果92-97
• 致謝97

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4 孫軍濤;王洪新;呂文平;馬朝陽(yáng);婁在祥;戴易興;;耐熱β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表達(dá)及其酶學(xué)特性[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2011年04期

5 杜彥龍;石鵬君;張t;姚斌;;來(lái)源于青霉Penicillium sp.C6的β-1,3(4)-葡聚糖酶基因的克隆及酶學(xué)性質(zhì)分析[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào);2013年02期

6 孫國(guó)鳳;向口腔細(xì)菌導(dǎo)入重組葡聚糖酶[J];生物技術(shù)通報(bào);1991年06期

7 藍(lán)海燕,陳正華;葡聚糖酶及其在植物中的發(fā)育調(diào)節(jié)和防衛(wèi)反應(yīng)[J];生物技術(shù)通報(bào);1998年04期

8 唐治玉;王淮;熊善柏;王琳;;β-1,3-葡聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)酶條件[J];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年05期

9 高雯;楊合同;吳遠(yuǎn)征;王貽蓮;;木霉產(chǎn)生的β-1,3-葡聚糖酶[J];山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年01期

10 謝焱;顧國(guó)賢;李崎;;重組β-1,3-1,4-葡聚糖酶的純化及部分酶學(xué)性質(zhì)研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年20期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 阮小蕾;李華平;;秈稻中一個(gè)完整β-1.3-葡聚糖酶基因的克隆與測(cè)序[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文集[C];2005年

2 王小龍;宋金柱;;角毛殼菌葡聚糖酶基因的獲得及生物信息學(xué)分析[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2012年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

3 萬(wàn)平平;王清海;李安娜;丁愛(ài)云;黃玉杰;;β-1,3-葡聚糖酶的純化、特性及其抗菌活性[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2004年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

4 阮小蕾;李華平;;秈稻中一個(gè)完整B-1.3-葡聚糖酶基因的克隆與測(cè)序[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文摘要集[C];2005年

5 何瑋璇;習(xí)欠云;江青艷;張永亮;;β-1,3-1,4葡聚糖酶在CHO細(xì)胞中表達(dá)及活性檢測(cè)[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

6 馮家勛;龐浩;段承杰;封毅;許躍強(qiáng);張鵬;趙廣存;莫新春;唐紀(jì)良;;未培養(yǎng)微生物纖維素酶基因資源的挖掘[A];中國(guó)資源生物技術(shù)與糖工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

7 文鳳云;廖富，

本文編號(hào)：786530