應(yīng)用基因芯片篩選轉(zhuǎn)染FOXO1后A549細(xì)胞差異表達(dá)基因
發(fā)布時(shí)間:2017-09-02 03:25
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【摘要】:目的研究轉(zhuǎn)染叉頭蛋白O1(FOXO1)后A549細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變,為深入探討FOXO1在急性肺損傷中的作用機(jī)制提供線索。方法應(yīng)用腫瘤壞死因子α(TNF-α)刺激A549細(xì)胞,應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法將真核表達(dá)載體GV230-FOXO1轉(zhuǎn)染入經(jīng)TNF-α誘導(dǎo)的A549細(xì)胞,再提取細(xì)胞的總RNA,應(yīng)用基因芯片技術(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果成功構(gòu)建并驗(yàn)證了FOXO1真核表達(dá)載體,提取了高質(zhì)量的mRNA進(jìn)行芯片分析,并通過RNA質(zhì)量控制(RNA QC)驗(yàn)證。芯片分析結(jié)果顯示差異表達(dá)基因中上調(diào)的基因有317個(gè),下調(diào)的基因有237個(gè)。這些差異表達(dá)的基因功能涉及細(xì)胞增殖、凋亡、分化等多個(gè)方面。結(jié)論應(yīng)用基因芯片技術(shù)可成功篩選轉(zhuǎn)染FOXO1基因后A549細(xì)胞的差異表達(dá)基因。FOXO1在急性肺損傷中可能通過改變細(xì)胞的增殖、凋亡與分化等水平來影響疾病的進(jìn)程。
【作者單位】: 廣東藥科大學(xué)研究生學(xué)院;廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 叉頭蛋白O 基因芯片 A細(xì)胞 急性肺損傷
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號:81070003);國家自然科學(xué)基金青年基金(編號:81200002)
【分類號】:R563
【正文快照】: 510010)急性肺損傷(ALI)及其更嚴(yán)重階段急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是臨床危重癥發(fā)生急性呼吸衰竭的主要原因,病死率高達(dá)50%[1]。ALI發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜,迄今為止尚未闡明清楚,其實(shí)質(zhì)是過度放大的炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)共同作用的結(jié)果。叉頭蛋白O1(FOXO1)是叉頭蛋白(Forkhead box
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1 高坤;特布他林對A549細(xì)胞吞噬凋亡嗜酸性粒細(xì)胞及分泌IL-6和IL-8的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年
2 張芳;二氧化硅刺激的離體A549細(xì)胞AQP-1、AQP-4表達(dá)研究[D];華北理工大學(xué);2015年
,本文編號:776118
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