本文關(guān)鍵詞：犬細(xì)小病毒VP2基因克隆及原核表達(dá)分析

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【摘要】：試驗(yàn)旨在了解河北與甘肅地區(qū)犬細(xì)小病毒流行情況,并通過原核表達(dá)系統(tǒng)獲得犬細(xì)小病毒VP2蛋白,制備該蛋白的多克隆抗體,為進(jìn)一步研究犬細(xì)小病毒致病機(jī)理和治療方法奠定基礎(chǔ)。從10份疑似感染犬細(xì)小病毒犬的病料中提取病毒基因組DNA,并以其作為模板進(jìn)行VP2基因的PCR擴(kuò)增,將目的片段進(jìn)行測(cè)序和分析后克隆至原核表達(dá)載體pET-30a中,陽性質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞并誘導(dǎo)表達(dá),誘導(dǎo)產(chǎn)物經(jīng)SDSPAGE鑒定表達(dá)后切割目的蛋白條帶免疫豚鼠制備多克隆抗體。序列分析結(jié)果顯示成功克隆VP2基因,10株分離株中CPV-2a型占80%,CPV-2b型占20%。本試驗(yàn)檢測(cè)的毒株與部分中國毒株形成了一個(gè)分支,與韓國、美國分離株呈現(xiàn)一定差異,與意大利分離株同源性較低。Western blotting分析證實(shí)了通過原核表達(dá)系統(tǒng)成功獲得的大小為70ku左右的重組蛋白具有反應(yīng)原性和免疫原性。該試驗(yàn)初步表明河北與甘肅地區(qū)以CPV-2a型為主,原核表達(dá)的VP2蛋白具有良好的抗原性,本試驗(yàn)結(jié)果為犬細(xì)小病毒的防控提供科學(xué)依據(jù)。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室農(nóng)業(yè)部草食動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室;廊坊市動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】： 犬細(xì)小病毒 VP 基因型 原核表達(dá)
【基金】：甘肅省重大專項(xiàng)(1203NKDA027)
【分類號(hào)】：S852.65
【正文快照】： 犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒(canine parvo-virus,CPV)感染引起的一種急性烈性傳染病[1],臨床上以急性出血性腸炎、嘔吐為主要特征[2]。其感染不分年齡和品種,但斷奶后的幼犬發(fā)病率較高,可引起非化膿性心肌炎。1978年CPV首次被發(fā)現(xiàn)[3],屬于細(xì)小病毒科,細(xì)小病毒屬,是無囊膜單股

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 渠川玫;彭傳貴;吳建華;郭淑杰;徐在海;李德榮;梁士哲;范文光;王振山;左小剛;;犬細(xì)小病毒在乳貓腎細(xì)胞內(nèi)生長動(dòng)態(tài)觀察[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1986年06期

2 劉曉松,李京玉,宋愛軍,張喜彥,布日古德;犬細(xì)小病毒與犬瘟熱病毒特異性免疫核糖核酸制劑的應(yīng)用研究[J];內(nèi)蒙古畜牧科學(xué);1999年02期

3 易立;程世鵬;;犬細(xì)小病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];特產(chǎn)研究;2008年01期

4 杜強(qiáng);邱薇;范泉水;劉華;李作生;鄭穎;張富強(qiáng);;犬細(xì)小病毒的分離鑒定[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年03期

5 陳強(qiáng);畢聰明;肖銀霞;;犬細(xì)小病毒生物學(xué)特性淺析[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2009年08期

6 羅朝科，李超美，，盛正太;進(jìn)境犬中犬細(xì)小病毒的分離鑒定[J];中國畜禽傳染病;1995年04期

7 褚秀玲;蘇建青;羅明;;犬細(xì)小病毒研究進(jìn)展[J];張家口農(nóng)專學(xué)報(bào);2002年01期

8 韓磊,靳興軍,郭峰,梁明珍,

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