大豆Pre-miRNAs作為內參基因在鹽堿脅迫下的表達穩(wěn)定性分析
發(fā)布時間:2017-09-01 07:39
本文關鍵詞:大豆Pre-miRNAs作為內參基因在鹽堿脅迫下的表達穩(wěn)定性分析
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【摘要】:【目的】對比大豆Pre-miRNAs候選內參基因和傳統(tǒng)內參基因的表達穩(wěn)定性,篩選出適合鹽、堿脅迫條件下RT-qPCR分析的最穩(wěn)定內參基因。【方法】選用了6個保守的Pre-miRNAs基因和4個常規(guī)的內參基因作為候選內參基因,通過RT-qPCR的方法,利用GeNorm和NormFinder軟件,評價了10個候選內參基因在大豆鹽、堿脅迫條件下的穩(wěn)定性!窘Y果】大豆鹽脅迫下,葉中表達最穩(wěn)定的基因組合是Pre-miR166和Pre-miR172,表達最穩(wěn)定的單一基因是FboX;根中表達最穩(wěn)定的基因組合是Act11和EF1A,表達最穩(wěn)定的單一基因是Act11。大豆堿脅迫下,葉中表達最穩(wěn)定的基因組合是Pre-miR393和Pre-miR172,表達最穩(wěn)定的單一基因是Pre-miR393;根中表達最穩(wěn)定的基因組合是Act11和60S,表達最穩(wěn)定的單一基因是Pre-miR172!窘Y論】大豆Pre-miRNAs可以與傳統(tǒng)內參基因一樣作為內參定量目的基因。
【作者單位】: 吉林農業(yè)大學生物反應器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;吉林農業(yè)大學生命科學學院;東北師范大學附屬中學;
【關鍵詞】: 大豆 鹽脅迫 堿脅迫 熒光定量PCR Pre-miRNAs(前體miRNAs) 內參基因
【基金】:國家轉基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08010-002) 國家自然科學基金項目(31271746,31201144) 吉林省發(fā)改委項目(JF2012C002-04)
【分類號】:S565.1
【正文快照】: 熒光定量PCR是一種快捷、準確、強大的定量分析技術,但其結果的可靠性取決于內參基因是否穩(wěn)定[1-2]。傳統(tǒng)內參基因的選擇通常選用構成細胞器骨架基本組分或參與生物體內基本代謝過程穩(wěn)定表達的基因[3-5]。但是,近年來的研究發(fā)現,在不同類型的細胞和組織中、發(fā)育的不同階段以及,
本文編號:770808
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