本文關鍵詞：三種檢測內源性基因修飾方法比較

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【摘要】：為獲得準確的突變信息,除直接測序外,實驗初步確定了3種人工核酸酶生物學活性檢測方法。利用Surveyor nuclease、T7E1(T7 Endonuclease 1)和HRM(High resolution melt),均以變性退火突變型和野生型DNA序列形成扭曲的雙螺旋DNA(distorted duplex DNA)為基礎的3種人工核酸酶生物學活性檢測方法,確定目標位點是否發(fā)生突變。實驗成功檢測出作用于綿羊MNST基因第一外顯子的CRISPR/Cas9和第三外顯子的TALEN目標位點發(fā)生突變,并對3種檢測方法的結果和特點進行了分析比較,得出3種檢測方法的優(yōu)缺點,為實驗室分析確定細胞利用非同源末端連接修復DNA雙鏈斷裂結果提供參考。
【作者單位】： 新疆生產建設兵團綿羊繁育生物技術重點實驗室;石河子大學動物科技學院;
【關鍵詞】： 基因組編輯 Surveyor核酸酶 T Endonuclease I 高分辨率熔解曲線(HRM)
【基金】：國家自然科學基金項目(31360276) 兵團院士資金專項(2007JC19) 兵團國際合作項目(2013BC004) 新疆兵團綿羊繁育生物技術重點實驗室項目(2013KLS01) 優(yōu)質轉基因肉羊新品種培育項目(2013ZX08008-003)
【分類號】：Q78
【正文快照】： 基因突變已成為當今生命科學研究的熱點之一,其檢測方法也隨之迅速發(fā)展,變性高效液相色譜分析,單鏈構象異構多態(tài)分析技術,毛細管電泳,直接測序,變性梯度凝膠電泳與化學或酶促裂解等突變檢測方法中,酶錯配切割(Enzyme mismatchcleavage,EMC)方法臨床應用簡單,具有一定的優(yōu)越性

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 張建佚;馮潔;楊澤;霍正浩;;高分辨率熔解曲線小擴增子法結合混樣法在線粒體13928G>C突變分析中的應用[J];中國醫(yī)藥生物技術;2009年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 王s，

本文編號：769836