本文關(guān)鍵詞：弓形蟲Rhomboid-IL-2基因重組卡介苗的構(gòu)建及其對犬的免疫效果

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【摘要】：目的構(gòu)建弓形蟲Rhomboid以及犬白介素2基因重組卡介苗,并觀察其對免疫犬的免疫效果。方法將鑒定正確的弓形蟲Rhombiod基因和犬IL-2基因一起克隆到大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達載體和整合表達載體中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pMV261(361)-IL2-Rho。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入卡介苗中,對表達產(chǎn)物進行SDS-PAGE電泳分析及Western blot鑒定。分別用重組卡介苗pMV261(361)-IL2-Rho和pMV261(361)-Rho經(jīng)皮下免疫犬,檢測免疫犬體液及細胞免疫水平變化并觀察其存活時間。結(jié)果成功構(gòu)建pMV261(361)-IL2-Rho重組質(zhì)粒,弓形蟲Rhomboid基因在重組卡介苗中穩(wěn)定表達46ku的目的蛋白,Western blot顯示該蛋白能被弓形蟲感染鼠血清識別。動物實驗表明,rBCGpMV261(361)-IL2-Rho能誘導(dǎo)產(chǎn)生較強的體液免疫和Th1型細胞免疫應(yīng)答反應(yīng),rBCGpMV361-IL2-Rho免疫組感染弓形蟲后的存活時間組為(14.40±4.50)d,rBCGpMV261-IL2-Rho免疫組感染弓形蟲后的存活時間組為(13.00±4.75)d,較BCG對照組存活時間(8.20±5.45)d有所延長。結(jié)論 rBCGpMV261(361)-IL2-Rho蛋白具有免疫原性。該重組卡介苗對犬弓形蟲感染有一定保護效果。
【作者單位】： 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 Rhomboid基因 白介素 rBCG
【基金】：國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(No.201303042) 吉林省科技發(fā)展計劃項目(No.20130206023NY)
【分類號】：S852.4
【正文快照】： *?**?剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是呈世界分布的寄生性原蟲[1],可感染幾乎所有溫血動物。犬感染弓形蟲癥狀多較嚴重,幼犬感染弓形蟲癥狀類似犬瘟熱,眼瞼鼻腔分泌物增多,黏膜蒼白,運動失調(diào),神經(jīng)錯亂[1],重癥可引起死亡。目前尚缺乏安全有效治療弓形蟲病藥物,研制有效的疫苗

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本文編號：768079